Lab of Developmental Biology Hematoxylin Eosin Stain The
Lab of Developmental Biology Hematoxylin & Eosin Stain The Master´s Course 김선미
Lab of Developmental Biology Frozen Section for Stain H&E stain Immunostain Cresyl Violet In Situ
Lab of Developmental Biology Hematoxylin의 산화 (산화제 : 공기, sodium iodate, mercuric oxide) Principle • Hematoxylin solution 활성성분은 hematein이며, 이것은 Aluminum, Iron 등과 같은 금속이온과 복합체 로 존재. • Hematein+Aluminum 복합체를 Hematein lake라하며, 이는 p. H 2. 9 에서 (+)charge • 핵내에 존재하는 인산기는()charge를 띄고 있으므로 hematein lake와 결합. • 금속이온으로 aluminum이 사용되 었을 경우에는Hematoxylin이 청색으로 염 Hematein + 매염제(Aluminum) Hematein lake (복합체) p. H 2. 9에서 (+) Charge (-) Charge의 핵내 인산기와 결합 Bluing (청색화) (Ammonia water, tap water)
Lab of Developmental Biology Subject : H&E Stain Object 동결 절편한 난소와 정소의 H&E stain을 통해 stain의 원리와 절편한 조직의 구조를 알아보자.
Lab of Developmental Biology Methods und OCT compo ylene 5 min X : e v o m e r Step 1. Hydration Step 5. Eosin (Cytoplasm) 1. Eosin 3 min 1. 100% Et. OH 2 min 2. 95% Et. OH 2 min 3. 85% Et. OH 2 min 4. 70% Et. OH 2 min 5. Tap water 5 min Step 2. Hematoxylin stain (Nucleus) 1. Harris hematoxylin 5 min 2. Tap water 2 min Step 3. Hematoxylin differentiator 1. 1% HCl-Et. OH 5~10 dip Step 4. Blueing 1. 0. 5% Ammonia water 5~10 dip Step 6. Dehydration 1. 70% Et. OH 2 min 2. 85% Et. OH 2 min 3. 95% Et. OH 2 min 4. 100% Et. OH 2 min Step 7. Clearing or Dealcoholization 1. Xylene I 3 min 2. Xylene II 3 min Step 8. Mount & observation
Lab of Developmental Biology Ovary CO SE ME OF 피질(cortex) 표면상피(superficial epithelium) 수질(medulla) 난포(ovarian follicle) x 15 원시난포(primordial follicle) x 400 FC 난포상피세포(follicular epithelial cell) ZP 투명층(zona pellucida) OC 난모세포(oocyte) TC 난포막(theca cell)
Lab of Developmental Biology Ovarian-follicle 일차난포(primary follicle), x 100 GC: 과립층세포(granulosa cell) TC: 난포막세포(theca cell) PF: 원시난포(primordial follicle) 후기 이차난포, x 15 OC: 난모세포(oocyte) FE: 난포상피(follicular epithelium) TI: 내난포막(theca interna) TC: 내난포막세포(theca interna cell) 초기 이차난포(secondary follicle), x 100 OC: 난모세포(oocyte) ZP: 투명층(zona pellucida) AN: 난포동(antrum) 후기 이차난포, x 40 AN: 난포동(antrum) GC: 과립층세포(granulosa cell) TE: 외난포막(theca externa) ST: 지질(stroma)
Lab of Developmental Biology Testis sd sc sz sg sg sc sd sz 정조세포(spermatogonia) 정모세포(spermatocyte) 정세포(spermatid) 정자(spermatozoa) x 150 x 40
Lab of Developmental Biology Mouse Blood vessel Cardiomyocyte
- Slides: 18