La chlorophylle I EXTRACTION DE LA CHLOROPHYLLE BRUTE

La chlorophylle

I. EXTRACTION DE LA CHLOROPHYLLE BRUTE Pilon BROYAGE Feuille verte Mortier Papier filtre Entonnoir FILTRATION - Acétone ou Alcool à 95° - Sable - Sulfate de sodium anhydre - Carbonate de Calcium Solution Alcoolique de On broie des feuilles d'une plante bien verte dans Chlorophylle brute SACB Øde l'acétone (ou de l'alcool à 95°) Ø de sable (broyage des membranes) Ø de sulfate de sodium anhydre (déshydratation) Ø de carbonate de calcium (neutralisation des acides organiques) jusqu'à l'obtention d'une solution bien verte, puis on filtre. On a la Solution Alcoolique de Chlorophylle Brute (SACB)

II. SÉPARATION DES PIGMENTS DE LA CHLOROPHYLLE BRUTE

1. SEPARATION DES PIGMENTS DE LA CHLOROPHYLLE BRUTE PAR SOLUBILITE SELECTIVE Ampoule à décanter Support Pilier Mortier Feuille verte Becher

Solution Alcoolique de chlorophylle Brute SACB 1 volume Ether de pétrole 1/5 volume

Solution BENZENIQUE Chlorophylle a Chlorophylle b Solution ALCOOLIQUE Xanthophylle Carotène

Ampoule à décanter AGIT ATIO N Solution alcoolique de chlorophylle brute SACB + Benzène + Eau REPOS Solution BENZENIQUE Chlorophylle a Chlorophylle b Solution ALCOOLIQUE Xanthophylle Carotène

A Remarques D E B C F Les couleurs variées de certaines feuilles sont dues aux proportions relatives différents types de pigments dans les chloroplastes comme les chlorophylles et les caroténoïdes et dans la vacuole comme les anthocyanes ( du rouge au bleu)

2. SEPARATION DES PIGMENTS DE LA CHLOROPHYLLE BRUTE PAR CHROMATOGRAPHIE Déposer une goutte de chlorophylle brute sur une feuille de papier Whattman n° 1. Placer la feuille de papier dans un récipient hermétique dans lequel on a placé un solvant Le solvant monte dans la feuille par capillarité Il entraîne les pigments de manière différentielle selon leur affinité avec le solvant