Kpalkot eljrsok A lumineszcencia nhny alklamazsrl Mikroszkpok hagyomnyos

Képalkotó eljárások A lumineszcencia néhány alklamazásáról

Mikroszkópok hagyományos optikai mikroszkóp konfokális mikroszkóp fluoreszcencia-élettartam mérése Endoszkópok, távcsövek Fotoelektron-sokszorozó – sokcsatornás síkdetektor (photomultiplier) (microchannelplate detector) kapuzható képerősítő (gated image intesifier) Streak camera

Milyen információt szolgáltathat a lumineszcencia? • Intenzitás-eloszlás • Spektrális eloszlás • Időbeli eloszlás, élettartameloszlás

Bazsalikom levél, szekréciós mirigy az epidermisz felszínén (a kék-zöld fluoreszcencia a sejtfal anyagok pl. , ferulasav, viaszok, illetve a flavonoidok fluoreszcenciaja) lexc= 351 nm lemi= 385 -470 nm kék 515 -550 nm zöld > 650 nm vörös 100 m

C A 32 m B D Sorghum levél felszine: lexc= 351 nm lemi= 385 -470 nm kék 515 -550 nm zöld > 650 nm vörös 100 m 32 m A B C D Fluoreszcencia réteg felvételek cirok levélen A felszínen a sejtfal alkotók kék-zöld fluoreszcenciája dominál, beljebb a fotoszintetizáló sejtek klorofilljáé.

Dane. Py infiltrált spenót levél, a felszíntől 15 m mélységben (mezofill sejtek) l em > 650 nm 505 nm < l em <550 nm l exc = 351, 364 nm, Ar laser

Összetett kép (zöld + vörös fluoreszcencia) és intenzitás eloszlás a jelzett egyenes mentén

Dane. Py infiltrált spenót levél, fotoinhibíciós kezelés 45 min után: • a levél fotoszintetikus aktivitásának kb. 2/3 -a elvész, • ha proteináz inhibitor jelenlében végezzük el a kísérletet, akkor kb 15% • D 1 protein károsodás detektálható • jelentős pigment bleach (total pigment) és lipid peroxidáció még nincs 0’ 15’ 30’ l exc = 351, 364 nm l em > 650 nm 505 nm < l em <550 nm 45’

Fluorescence lifetime imaging

A több-fotonos gerjesztés alapelve

Hőmérséklet-mérés foszforeszcenciaélettartam alapján

Fotoelektronsokszorozók

Fotoelektronsokszorozó működési elve

Microchannel plate detector működési elve

Kapuzható képerősítő működési elve

Példa a kapuzott képerősítő használatára

Streak camera működési elve

Streak camera használata fotokróm spirobenzopirán vizsgálatában

Egy felvétel