INIBIO DA TRIPTOFANILt RNA SINTETASE WARS EM CLULAS
INIBIÇÃO DA TRIPTOFANIL-t. RNA SINTETASE (WARS) EM CÉLULAS DE C NCER DE BEXIGA POR MEIO DE RNA DE INTERFERÊNCIA CAVALCANTE, A. C. F. ; SILVA, J. B. ; SILVA, A. ; SANTOS, L. F. ; BARBOSA, C. D. S. ; DELLÊ, H. Universidade Nove de Julho – São Paulo – SP – Brasil INTRODUÇÃO RESULTADOS OBJETIVO O objetivo do estudo é verificar se as células de CB (T 24 e RT 4) que expressam IDO tem maior produção de WARS e se a inibição da WARS tira a possível proteção que essa molécula oferece. A T 24 Viabilidade Celular 0, 60 0, 55 0, 50 0, 45 0, 40 0, 35 0, 30 Controle B 0, 03 0, 003 RT 4 1, 6 1, 4 1, 2 1, 0 0, 8 0, 6 0, 4 0, 2 0, 0 Controle MATERIAIS E MÉTODOS 0, 3 WARS+Lipofectamina - p. Mol/u. L Viabilidade Celular O câncer de bexiga (CB) está entre os carcinomas humanos com maior incidência no Brasil e no mundo. Expressa em diversos tipos de tumores, a indoleamina 2, 3 -dioxigenase (IDO) é uma enzima imunomoduladora, responsável por promover o escape imunológico através da depleção do triptofano, aminoácido essencial no microambiente. Desta maneira, à medida que o aminoácido é degradado, é importante que uma reserva seja mantida. A triptofanil-t. RNA sintetase (WARS) é uma enzima necessária para síntese de proteínas, pois catalisa a ligação do triptofano ao seu t. RNA. Neste contexto, há indícios de que as células neoplásicas produtoras de IDO aumentam a expressão de WARS, a fim de proteger sua reserva de triptofano da degradação, uma vez que estes estarão ligados ao seu t. RNA. 0, 3 0, 003 WARS+Lipofectamina - p. Mol/u. L Fig 2. Viabilidade celular de T 24 (A) e RT 4 (B). Dados expressos em média ±DP, permitindo a comparação entre os grupos controle com as diferentes concentrações de i. RNA de WARS. T 24 Controle DISCUSSÃO E CONCLUSÃO i. RNA de WARS + Lipofectamina RT 4 Controle i. RNA de WARS + Lipofectamina Células incubadas por 24 h na estufa MTT Fig 1. Células de CB (T 24 e RT 4) foram divididas em grupos e incubadas com i. RNA de WARS em diferentes concentrações ( B e F 0, 3; C e G 0, 03; D e H 0, 003 p. Mol) em conjunto com a lipofectamina (0, 3 u. L) por 24 horas. Apoio FAPESP 2016 -04105 -0 Os resultados preliminares demonstraram que a inibição de WARS com i. RNA não surtiu efeito nas células de CB, quando comparados com o controle. Porém não se pode concluir o que de fato ocorreu. Portanto, é imprescindível a realização de novos experimentos, tal como uma PCR (Reação em Cadeia de Polimerase), no intuito de averiguar se de fato as células cancerosas ainda estão expressando WARS, mesmo após o processo de inibição com micro-RNA de interferência. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1 - ESTIMATIVA 2020: Incidência de câncer no Brasil. [S. l. ]: INCA, 8 maio 2020. Disponível em: https: //www. inca. gov. br/numeros-de-cancer. Acesso em: 10 nov. 2020. 2 - CHU, Carissa E. et al. Role of Indoleamine-2, 3 -Dioxygenase Inhibitors in Salvage Therapy for Non. Muscle Invasive Bladder Cancer. The Urologic clinics of North America, v. 47, n. 1, p. 111, 2020. 3 - PATIL, Pallavi A. et al. Expression of PD‐L 1, indoleamine 2, 3‐dioxygenase and the immune microenvironment in gastric adenocarcinoma. Histopathology, v. 73, n. 1, p. 124 -136, 2018. 4 - MIYANOKOSHI, Miki; YOKOSAWA, Takumi; WAKASUGI, Keisuke. Tryptophanyl-t. RNA synthetase mediates high-affinity tryptophan uptake into human cells. Journal of Biological Chemistry, v. 293, n. 22, p. 8428 -8438, 2018. 5 - ADAM, Isabell et al. Upregulation of tryptophanyl-t. RNA synthethase adapts human cancer cells to nutritional stress caused by tryptophan degradation. Oncoimmunology, v. 7, n. 12, p. e 1486353, 2018.
- Slides: 1