Ingeniera Gentica Objetivo Introducir al alumno en el

Ingeniería Genética Objetivo: Introducir al alumno en el conocimiento de la tecnología utilizada en la actualidad para, desde la aproximación experimental que caracteriza a la Genética Molecular, estudiar la función génica. Introduccion: La aproximación Genética al estudio de la Biología. Genética directa vs Genética reversa

Ingeniería Genética. Programa I. CARACTERIZACIÓN PRELIMINAR DE LA FUNCIÓN GÉNICA. Tema 1. Técnicas básicas de caracterización génica. Clonación. Hibridación de ácidos nucleicos. Rastreo de librerías. Southern, Northern y Western blot. RT-PCR. Proteínas recombinantes, actividad in vitro, Ab. Tema 2. La aproximación informática. Organismos modelo. Proyectos genoma. Explotación de la información contenida en las bases de datos. Tema 3. Búsqueda de genes con patrones de expresión determinados. Hibridación diferencial, micro-arrays, differential display, sustracción, SAGE. Hibridación in situ sobre cortes histológicos. Inmunolocalización. Tema 4. Transformación genética. Transformación transitoria. Producción de bacterias, plantas y animales transgénicos.

Ingeniería Genética. Programa II ALTERACIÓN CONTROLADA DE LA ACTIVIDAD GÉNICA. Tema 5. Mutagénesis clásica. Genética clásica vs. genética reversa. Generación de individuos mutantes, análisis fenotípico. Identificación del gen mutagenizado, clonaje posicional: cartografía molecular, paseo cromosómico. Confirmación de la identidad del mutante: Análisis de la actividad génica en el mutante, complementación. Tema 6. Genética reversa I. De la genética directa a la genética reversa, TILLING Tema 7. Genética reversa II. Mutagenesis insercional. Colecciones mutagenizadas por transposición. Rastreo de mutantes. Análisis genético, reversión. Gene trap. Tema 8. Genética reversa III. Mutagenesis dirigida. Recombinación homóloga, vectores. Análisis genético. Tema 9. Genética reversa IV. Construcciones antisentido. Diseño de construcciones antisentido. Detección de la presencia y efecto de la construcción AS. Análisis de la actividad génica. RNAi. Silenciamiento.

Ingeniería Genética. Programa III ANÁLISIS DE LA REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD GÉNICA (SEMINARIOS). Tema 10. Regulación de la actividad génica. El control de la transcripción en eucariotas. Tema 11. Elementos en cis. Clonación de promotores: rastreo de librerías genómicas y PCR inversa. Disección del promotor. Transformación transitoria, genes delatores, deleciones. Ensayos de retardo de la migración electroforética. Transformación estable. Tema 12. Elementos en trans. Clasificación. Rastreo en librerías de expresión. La técnica de One-hybrid. Caracterización de factores que actúan en trans: la técnica de selección por PCR, ensayos de transactivación, mutagénesis y genética reversa, regulación y desarrollo.

Ingeniería Genética. Programa PROGRAMA DE PRÁCTICAS 6 -11 al 17 -11 Práctica 1. Mutagenesis en E. Coli. Puntual y por inserción, Directa y reversa Práctica 2. Expresión transitoria de un gen delator, controlado por distintos promotores, mediante transformación biolística. Práctica 3. Purificación de una proteína recombinante

Ingeniería Genética. Bibliografía Tecnología Básica: SB Primrose and RM Twyman. Principles of Gene Manipulation and Genomics 7 th Edition. . Blackwell Manuales de Genética: GRIFFITHS, A. J. F. ; GELBART, W. M. ; MILLER, J. H. ; LEWONTIN, R. C. (2000). Genética moderna. Interamericana-Mc. Graw-Hill. (Madrid). GRIFFITHS, A. J. F. ; MILLER, J. H. ; SUZUKI, D. T. ; LEWONTIN, R. C. , GELBART, W. M. (1996). An Introduction to Genetic Analysis (6 Ed. ). W. H. Freeman & Company. New York. Traducida al castellano. Introducción al análisis genético. 1995. Interamericana-Mc. Graw-Hill. (Madrid). KLUG, W. S. , CUMMINGS, M. R. (1997). Conceptos de Genética (5 Ed. ). Prentice Hall, Inc. New Jersey. (la 5 Ed. está traducida al castellano. Conceptos de Genética. 1999. Prentice Hall, Inc. New Jersey). TAMARIN, R. H. (1995). Principios de Genética. Editorial Reverté, S. A. Barcelona. (Traducción de la 4 Ed (1993) de la obra original). Colección de artículos y revisiones (en inglés) sobre los temas del programa

Ingeniería Genética. Material entregado a los alumnos

Ingeniería Genética. Criterios de evaluación Examen. Estándar ? . Test? . Lectura crítica de trabajos Seminarios Estancia en el laboratorio? Otros?