Imunohematologick diagnostika gelov systm a automatizace MTC INVITRO

Imunohematologická diagnostika, gelový systém a automatizace MTC INVITRO Diagnostics AG Eliška Rýznarová Eurex Medica s. r. o. 1

MTC INVITRO Diagnostics AG Historie: • Firma MTC (Micro Typing Concepts) byla založena v roce 1987 jako výrobce a distributor produktů pro klinickou diagnostiku. • Více než 20 let je průkopníkem technologie gelové centrifugace. Nový směr vývoje: • Od roku 1990 se podílí na vývoji poloautomatizovaných a plnoautomatizovaných systémů pro imunohematologické laboratoře a poskytuje software. 2

MTC INVITRO Diagnostics AG Současnost: • 2008 zahájila vývoj a výrobu vlastních diagnostik produktové řady MTC INVITRO a zahajuje vývoj a výrobu inovovaného gelového systému INVITROGEL TESTSYSTEM. • 2009 získává první certifikaci CE na gelové karty, následují další včetně certifikace diagnostických erytrocytů. • 2010 na mezinárodní úrovni spouští kompletní řadu gelových karet pro AB 0 systém, Rh fenotyp, screening a identifikaci protilátek a další aplikace. Představuje novou řadu automatizovaných přístrojů INVITROLYZER. • Následně rozšiřuje výrobu o INVITROFLOW RAPID TEST SYSTEM, který umožní stanovit krevní skupinu AB 0 a Rh fenotyp bez přístrojového vybavení. 3

MTC INVITRO Diagnostics AG Cíl: • Inovace a vývoj nových produktů. • Představení svých novinek na 33. mezinárodním kongresu ISBT v Soulu, v Jižní Koreji ve dnech 31. 5. - 5. 6. 2014: INVITROLYZER OCTAVIAN – hybridní plnoautomat (walk away) pro testování na gelových kartách INVITROOCTA s 8 gelovými sloupci současně s testováním na mikrotitračních deskách INVITROPLATE INVITROLYZER CA-120 – plnoautomat (walk away) pro gelové karty INVITROGEL se 6 gelovými sloupci INVITROREADR SIRACUSE – readr 2. generace pro gelové karty INVITROGEL INVITROFLOW karty pro vyšetření krevních skupin rychlou laterální difuzí 4

MTC INVITRO Produkty • INVITROGEL TEST • SYSTEM: 6 sloupcové gelové karty 8 sloupcové gelové karty INVITROOCTA • INVITROCLONE Liquid Reagents • INVITROLIQ Liquid Reagents • INVITROPLATE Microplates • INVITROFLOW Rapid Test System • INVITROLYZER Automated Immunohematology 5

Gelový systém INVITROGEL TEST • SYSTEM Způsob aplikace sloupcové chromatografie pro použití v imunohematologii objevil francouzský vědec Yves Lapierre. Vynález gelové matrice ve sloupcích plastových karet vyvolal revoluci v rutinním testování v imunohematologických laboratořích na celém světě a stal se zlatým standardem v sérologii krevních skupin. Kromě jiných výhod, jako jediná technika testování, umožní vizuálně rozlišit reakci dvojí populace erytrocytů (v jedné mikrozkumavce pozorujeme sediment erytrocytů + aglutinaci v gelu). Příčinou může být chybný pracovní postup a nebo je přirozeným jevem. 6

Reakce dvojí populace ery Srovnání s běžnými výsledky Sediment ery + aglutinace v gelu 7

Gelový systém Příčiny reakce dvojí populace erytrocytů 1. Vzájemná kontaminace krevních vzorků (pacientů, dárců, diagnostických ery). 2. Po alogenní transfuzi krve. Dvojí populace ery je umělá a dočasná. Je cílená nebo způsobená administrativní či laboratorní chybou. Lze pozorovat i PAT s dvojí populací ery po transfuzi: aloprotilátka pacienta se váže pouze na ery DK. 3. Po transplantaci KD, kmenových buněk. Prvním průkazem přijetí dřeně je zjištění populace ery antigenně odlišných, je možno ji pozorovat již 14 dnů po transplantaci. V konečné fázi po přijetí se všechny antigenní systémy mění v dárcovské. 4. Po intrauterinní transfuzi. 5. V případě fetomaternálních a maternofetálních inkluzí. 6. Slabé podskupiny A, B (zejména A 3). 7. Částečná ztráta antigenu jako důsledek leukémie. 8. Získaný antigen B u krevní skupiny A 1. 9. Polyaglutinabilita ery (T-Tn aktivace ery, bakteriální kontaminace roztoků !) 10. Mozaicismus (Rh při myeloproliferativních nemocněních). V jednom organismu se vyskytují dvě nebo více buněčných linií s odlišným genotypem, které pochází z 1 zygoty. 11. Chimérizmus (dvě nebo více buněčných linií s odlišným genotypem v jednom organismu pochází z jednoho či více původních jedinců). 8

Faktory, způsobující částečné zadržování ery na povrchu gelu Částečně zadržované ery se jeví jako velmi tenká červená linka na povrchu gelu. Nejedná se o obraz dvojí populace ery a neznamená to pozitivní výsledek. Příčiny: • Vlákna fibrinu – u čerstvých vzorků ne zcela řádně odebraných nebo nedostatečně centrifugovaných. • Koagulační faktory - uvolněné do plazmy (starší vzorky). • Vysoký počet leukocytů – vytváří bariéru na povrchu gelu. • Podpovrchové antigeny (kryptoantigeny), odhalené působením bakteriálních enzymů u ne zcela čerstvých ery, mohou reagovat s protilátkami v séru vzorků. • Přítomnost protilátek proti tzv. senescentním (stárnoucím) antigenům. 9

INVITROGEL Test • System Přístrojová technika pro manuální testování 10

INVITROREADER Sicaruse Přístrojová technika pro manuální testování Readr 2. generace pro gelové karty INVITROGEL (6 sloupcové) Software: NAVEGATOR Váha 2, 6 kg š 18 / v 11 / h 35 cm 11

INVITROGEL Test • System Srovnání gelových karet 6 a 8 sloupcových pro manuální testování možno kombinovat 12

Gelové karty INVITROGEL se 6 mikrozkumavkami • AB 0 RH A-B-D-CDE-CTL • AB 0 Newborn A-B-AB-D-AGH-CTL • A-B-D / A-B-D dva typy karet, rozdílné klony, DVI- • AB 0 DII DAT A-B-D-D-CTL-AGH obě DVI • ABD VI+ Donor • AB 0 reverse A-B-D(VI-)-Neutral-Neutral (CTL) • AB 0 Crossmatch A-B-D (VI-)-Neutral-AGH (CTL) • Podskupiny A 1 a H na jedné kartě • Rh fenotypizace + K 2 typy karet (klony 1 + klony 2) • Rh fenotypizace + D • Kell DUO (anti-Kell klon 1 + klon 2) • Neutral • Polyspecifické AGH (anti-Ig. G + C 3 d) • Monospecifické anti-Ig. G • AGH (Coombs) + Neutral • DAT Screen (Ig. G-C 3 d-CTL/Ig. G-C 3 d-CTL) 13

Gelové karty INVITROGEL se 6 mikrozkumavkami 14

Gelové karty INVITROGEL se 6 mikrozkumavkami Ověření krevní skupiny, „půlené karty“, rozdílné klony, DVI- 15

Gelové karty INVITROOCTA s 8 mikrozkumavkami • AB 0 RH 1 Reverse: A-B-D(VI-) 4 x Neutral (CTL) • ABD: A-B-D-Neutral / A-B-D-Neutral • AB 0 CC: A-B-D-3 x Neutral-2 x AGH • AB 0 Crossmatch • Podskupiny A 1 a H • Anti-D (VI-) 8 x • Anti-D (VI+) 8 x • Rh Pheno DUO: C-c-E-e (klony 1) / C-c-E-e (klony 2) • Rh Complete Pheno + K: C-Cw-c-E-e-D(VI-)-D(VI+)-K • Kell DUO: 4 x klon 1 + 4 x klon 2 • Neutral • Polyspecifické AGH (anti-Ig. G + C 3 d) • Monospecifické anti-Ig. G • AGH Anti-Ig. G 16

Gelová karta INVITROOCTA s 8 mikrozkumavkami 17

Tekutá diagnostika pro gelové karty Testování na kartě NEUTRAL: Anti-A 1 lektin Anti- H monoclonal Anti-Cw monoclonal Anti-M monoclonal Anti-N monoclonal Anti-P 1 monoclonal Anti-s monoclonal Testování na kartě Coombs: Anti-k Anti-Fya Anti-Fyb Anti-Jka Anti-Jkb Anti-Lua Anti-Lub Anti-S Anti-s Potenciátory reakce, roztoky pro gelový systém: Invitropapain, Invitrobrom, Invitroliss 18

Tekutá diagnostika INVITROCLONE pro sklíčkové a zkumavkové testy, (MP) • Monoklonální diagnostika pro AB 0 systém • Lektiny anti-A 1 a anti-H • Anti-D(VI-) Ig. M (klon P 3 x 61) • Anti-D(VI-) Ig. M (klon MS-201) • Anti-D(VI-) Ig. M+Ig. G (klony P 3 x 61 + MCAD 6) • Rh Control • Diagnostika pro fenotypizaci Rh + K (klony 1 + 2) • Vzácná monoklonální diagnostika: Anti-Jka, Anti-Jkb Anti-Lea, Anti-Leb Anti-P 1 Anti-M, Anti-N Anti-S 19

Tekutá diagnostika INVITROLIQ Vzácná polyklonální Ig. G pro NAT ve zkumavce • Anti-K • Anti-k • Anti-Kpa, Anti-Kpb • Anti-Fya, Anti-Fyb • Anti-Jka, Anti-Jkb • Anti-S, Anti-s • Anti-Lua, Anti-Lub • Anti-Xga • Anti-Coa, Anti-Cob • Anti-Dia • Anti-Wra • Anti-P 1 (pro test v solném prostředí) 20

Potenciátory reakce a roztoky pro zkumavkové testy • AGH polyspecifické Anti-Ig. G+C 3 d • AGH monospecifická: Anti-Ig. G, Anti-C 3 d, Anti-C 3 b, Anti-C 4, Anti-Ig. A, Anti-Ig. M • LISS • Bromelin • Control Solution • Bovine Albumin 6%, 22% a 30% 21

Diagnostické erytrocyty 3% INVITROCYTE: 0, 8% INVITROCELL: Reverse A 1, A 2, B, 0 Reverse A 1, B Scan I, II Screen I, III Screen IP, IIIP Ident 11 P Coombs Control Reverse A 1, A 2, B, 0 Reverse A 1, B Pool Scan I, II Screen I, III DUO Screen I, III + IP, IIIP Ident 11 P 22

Univerzální kontroly kvality INVITROQC-C Plná krev 4 x 6 ml Zkumavka A: KS A, R 1 R 1 (CCD. ee), K+, anti-B Zkumavka B: KS B, R 1 R 2 (Cc. D. Ee), K-, anti-A a anti-K (nereaguje v enzym. testu) Zkumavka 0: KS 0, R 2 R 2 (cc. D. EE), K-, anti-A, anti-B Zkumavka AB: KS AB, rr (ccddee), K-, nepravidelná anti-D INVITROQC-S Séra (Anti-Fya weak) 3 x 5 ml INVITROQC-S Séra (Anti-c weak) 3 x 5 ml INVITROQC-S Séra (AB serum) 3 x 5 ml INVITROQC-S Kombi (Anti-Fya weak, Anti-c weak, AB serum) 3 x 5 ml 23

INVITROFLOW Rychlá technologie laterální difuze Postup vyšetření: 10 µl plné krve, za 1 minutu přidat 50 µl pufru, do 3 minut odečíst výsledek A-B-D(VI-)-CTL A-B-D(VI+)-CTL C-c-E-e 24

Plnoautomaty INVITROLYZER CA-120 – plnoautomat (walk away) pro gelové karty INVITROGEL se 6 gelovými sloupci INVITROLYZER Bartolomeu – plnoautomat (walk away) pro mikrotitrační desky INVITROPLATE INVITROLYZER OCTAVIAN – hybridní plnoautomat (walk away) pro testování na gelových kartách INVITROOCTA s 8 gelovými sloupci současně s testováním na mikrotitračních deskách INVITROPLATE 25

INVITROLYZER CA-120 Plně automatizovaný analyzátor pro testování na 6 sloupcových gelových kartách INVITROGEL • Pro 72 karet, 5 x 20 vzorků • 20 pozic pro reagencie • Odečet čárových kódů • Přední kryt s bezpečn. senzorem • Pro zk. o průměru 10 až 15 mm • Minimální objem vzorku 1 ml • Maximální objem vzorku 5 ml • Detekce bublin a sraženin • 48 pozic pro pipetování/inkubaci • Centrifuga pro 24 karet • Integrovaný readr • Software NAVEGATOR • Intuitivní dotykový monitor • 120 kg, š 120 / h 90 / v 100 cm 26

• non 27

INVITROLYZER Bartolomeu Plně automatizovaný analyzátor pro testování na mikrotitračních deskách INVITROPLATE • Pro 10 MP, 64 vzorků • 20 pozic pro reagencie • 400 testů za hodinu • Kontinuální vkládání vzorků • Urgentní vzorky • Odečet čárových kódů • Pro zk. o prům. 12 až 20 mm • Minimální objem vzorku 1 ml • Maximální objem vzorku 5 ml • Centrifuga pro 2 MP • Třepačka pro 1 MP • Integrovaný readr • Software NAVEGATOR • 120 kg, š 103 / h 90 / v 100 cm 28

INVITROLYZER OCTAVIAN Centurion Plně automatizovaný hybridní analyzátor pro testování na gelových kartách INVITROOCTA s 8 gelovými sloupci současně s testováním na mikrotitračních deskách INVITROPLATE 29

INVITROLYZER OCTAVIAN Centurion • Kapacita 96 vzorků, 24 gelových karet, 10 MP • Dvě nezávislá pracovní ramena • Detekce hladin 30

INVITROLYZER OCTAVIAN Centurion • Odečet čárových kódů vzorků, reagencií, MP, gelových karet • Intuitivní dotykový monitor • Modul pro pipetování a třepání MP 31

INVITROLYZER OCTAVIAN Centurion • Centrifuga pro 24 gelových karet • Váha 140 kg • Inkubátor pro 24 gelových karet • š 140 / v 100 / h 90 cm • Readr gelových karet a MP 32

Děkuji za pozornost 33