Immunoblottanals HIV testimiseks Mai Soonberg Stom II rhm
Immunoblott-analüüs HIV testimiseks Mai Soonberg Stom II rühm
Immunoblott (Western blot) • Analüüsimeetod valguliste antigeenide identifitseerimiseks ja määramiseks • Kasutatakse sekundaarse testina valepostitiivsete tulemuste välistamiseks • Eesmärgiks on HI-viiruse vastaste antikehade tuvastamine inimese vereplasmas
Analüüsi põhimõte I. HIV antigeenide segu lahutamine SDS-PAGE-l (naatriumdodetsüülsulfaat-polüakrüülamiid geelelektroforeesil) valkude lahutamine II. HIV antigeenide kandmine nitrotselluloosmembraanile III. Antigeen-antikeha reaktsioon: o membraani inkubeerimine inimese vereseerumiga o seondunud antikehade tuvastamine sekundaarse märgistatud antikehadega
Tulemused • Enamik institutsioone nõuavad positiivseks tulemuseks vähemalt kahe järgmise antigeeni reaktiivsust: p 24, gp 41, gp 120/160 • Praeguseks on üldtunnustatud, et negatiivne tulemus on kõikide band’ide puudumine • Määramatu tulemus on juhul, kui esineb ühe või enama antigeeni reaktiivsus, kuid ei ole täidetud positiivsuse kriteeriumid
Kasutatud materjal • • • http: //hivinsite. ucsf. edu/In. Site? page=kb-02 -02 -01#S 6. 1 X http: //biomedicum. ut. ee/armpgb/doktorant/Antikehad. pdf http: //www. eestiarst. ee/static/files/019/ea 1301 lk 51 -55. pdf http: //en. wikipedia. org/wiki/Western_blot http: //en. wikipedia. org/wiki/Diagnosis_of_HIV/AIDS#Western _blot
- Slides: 6