Hemograma Hemograma Conjunto de determinaciones que ofrecen informacin

Hemograma

Hemograma • Conjunto de determinaciones que ofrecen información sobre los procesos fisiológicos de la persona, reflejan la capacidad del organismo para reaccionar frente a la enfermedad. – sirve como indicador del progreso del paciente en estado patológico – interviene en el diagnóstico y el seguimiento – la prevención de los procesos infecciosos.

Determinaciones del hemograma • Pruebas Cuantitativas: Recuento celular(G. blancos y glóbulos rojos, hematocrito, concentración de hemoglobina, índices hematimétricos) • Pruebas Cualitativas: morfología celular(G. blancos, g. rojos y plaquetas)

– Recuento de hematíes o Glóbulos Rojos: numero de eritrocitos por volumen de sangre. – Recuento de Leucocitos o Glóbulos Blancos: numero de leucocitos por volumen de sangre. – Hematocrito: porcentaje que ocupa la masa eritrocitaria con respecto al volumen total de la sangre. – Concentración de Hemoglobina – Indices eritrocitarios: Proporcionan información sobre el tamaño y la concentración de Hb de los hematíes. – VSG o Eritrosedimentación – Formula Leucocitaria: aquí se determina el porcentaje de cada tipo de leucocito por la observacion de 100 células de la serie de leucocitos contados(o 50 o 200 celulas según el caso).

IMPORTANTE • Para la realización del Hemograma se utiliza sangre total con EDTA como anticoagulante. • Se utiliza una gota de anticoagulante para mínimo 2, 5 m. L de sangre

PRUEBAS CUANTITATIVAS

Hematócrito • El hematocrito (Hto) es la relación existente entre el volumen de eritrocitos y el volumen total de sangre, expresado como porcentaje. • depende parcialmente de la concentración de hemoglobina(Hb • pero independientemente de la Hb, su valor también varia con el volumen plasmático.

Procedimiento (Microhematócrito) - Micrométodo • Llenar dos tubos capilares(no heparinizados) hasta alrededor de las 3/4 partes con sangre anticoagulada. • Sellar el extremo del capilar con el anillo coloreado con arcilla no absorbente. • Equilibrar los capilares en la centrifuga con los extremos obturados hacia la periferia. • Cerrar la tapa de la centrifuga. Centrifugar por 5 min entre 10. 000 y 15. 000 rpm. • Hacer la lectura del hematócrito mediante un ábaco. No incluir la capa de blancos y plaquetas. • Los valores de hematócrito de ambos capilares deben coincidir

• Macrohematócrito: se realiza con tubos llamados de Wintrobe y se centrifuga por media hora a 2500 rpm (muy poco utilizado) • El rango de referencia del Hto varia con la edad, sexo, raza, nutrición, embarazo, consumo de medicamentos. • En los fumadores se encuentra aumentado.

Lectura del Hematocrito

Factores de Error • Las fugas de muestra al no quedar bien sellado los capilares, y perderse mayor proporción de células que de plasma. • Anticoagulantes líquidos provoca un error por dilución de la muestra. • En muestras capilares no descartar la primer gota, hemodilución. • En muestras de sangre venosa, la liga colocada durante un cierto tiempo produce hemoconcentración. • La lectura no inmediata de los capilares, provoca que el

Hemoglobina • Método de la Cianometahemoglobina Fundamento 1. Hb + ferricianuro de K 2. Meta. Hb + cianuro de K meta. Hb

Procedimiento • 1. Agregar 20 μl de sangre a 5, 0 ml de reactivo de cianometahemoblobina. • 2. Enjuagar la pipeta por completo con el reactivo para no perder muestra. • 3. Tapar y mezclar bien por inversión. Dejar en reposo 10 minutos a Tº ambiente para permitir la conversión completa de Hb a Cianometa. Hb. • 4. Luego leer la absorbancia en el espectrofotómetro a 540 nm, usando el reactivo como blanco. • 5. La concentración se puede obtener a partir de la curva de calibración o usando un factor que se obtiene a

Curva de Calibración de la Hemoglobina Tubo • • • Reactivo de Drabkin 1 2 3 4 5 6 (desconocido)* • 7 (desconocido)* Estándar/desconocido 5 ml 10 ml 15 ml 20 ml 5 ml 20 ul 20 ul 5 ml 20 ul *El desconocido se realiza por duplicado.

Causas de Error • • Errores de extracción Coagulación parcial de la sangre. Empleo de pipetas automáticas descalibradas u otras pipetas sucias o húmedas. No eliminación del exceso de sangre adherida a las paredes externas de la puntera antes de introducirlo en el reactivo. Empleo de reactivo de Drabkin mal preparado o vencido Lectura antes del tiempo necesario para la completa transformación de la Hb en Hi. CN. Empleo de instrumentos no calibrados Cubetas sucias o deterioradas

Recuento Celular • La que se utiliza normalmente es la cámara de Neubauer que está formada por un retículo que es un cuadrado grande de unos 3 mm de lado por lo que su superficie es de 9 mm 2. La superficie total está dividida en 9 cuadrados de 1 mm de lado. • Los cuatro cuadrados de las esquinas están divididos en 16 cuadrados medianos y el cuadrado central está dividido en 25 cuadrados medianos. • Cada uno de ellos está dividido en 16 cuadrados pequeños. Por lo tanto, en el cuadrado central tendremos 400 cuadrados

• Dilución en Tubo • Dilución en Pipeta de thoma para cada uno de los tipos celulares, g. rojos y g. blancos.

Recuento de Globulos Rojos • Consiste en hacer el recuento en una dilución de sangre entera anticoagulada. • Líquido diluyente: solución fisiológica. – Cargar 3, 98 ml de Liquido de dilución isotónico para evitar la lisis de los hematíes en un tubo de ensayo pequeño – Agregar 0, 02 ml(20 µl) de sangre entera previamente homogeneizada – Dejar en reposo por 10 minutos – Cargar la cámara de neubauer. – El recuento de hematíes se realiza en el cuadrado central, se eligen 5 de los cuadrados que se encuentran subdivididos en 16 cuadrados pequeños

• Nº de hematíes/mm 3 = células contadas en 5 cuadrados X factor de dilución X 10 Área contada • Área: 1/5 mm 2, porque se cuentan 80 cuadraditos de 400. • Los valores normales varían con la edad y el peso.

Recuento de Glóbulos Blancos • a. Cargar 0. 38 ml de reactivo de Turk (Esta solución contiene acido acético al 1 % en agua destilada y el agregado de una punta de espátula de azul de metileno) • b. 20 µl de muestra bien homogeneizada • c. Dejar en reposo unos minutos. • d. Cargar la cámara a ambos lados. • e. contar inmediatamente.

• Se cuentan los cuadrados mas grandes. • El recuento se realizará al microscopio en 10 X. Para realizar el cálculo se utiliza la fórmula: • Nº de leucocitos/mm 3= células contadas en 4 cuadrados X 10 X factor de dilución Área contada(4 mm 2) • OBS: La variación entre los 4 cuadrantes no debe superar las 10 células. En caso contrario debe cargarse nuevamente la cámara.

Índices Eritrocitarios o Índices Hematimétricos • Volumen Corpuscular Medio • Hemoglobina Corpuscular Media • Concentración de Hb corpuscular media.

Volumen Corpuscular Medio (VCM) Volumen promedio de los eritrocitos, expresado en fentolitros(10 -15) VCM= Hematocrito x 10 = 45 x 10 = 90 f. L Glóbulos rojos 5 Rango de Referencia: 80 – 94 f. L

Hemoglobina Corpuscular Media(HCM) • Peso medio de la hemoglobina en un hematie expresado en picogramos. (10 -12) HCM= Hemoglobina x 10 Glóbulos rojos Rango de Referencia: 28 – 32 pg

oncentracion de Hb corpuscular media. (CHCM) • Concentración media de hemoglobina en cada eritrocito en g/d. L CHCM= Hb(g%)x 100 Hto(%) Rango de Referencia: 32 – 37 g/d. L En células hipocromicas: Menor a 32 g/d. L

Velocidad de Sedimentación Globular (VSG) • O Eritrosedimentación • cantidad de mm que los eritrocitos sedimentan en 1 hora, y es afectada x los eritrocitos, el plasma, y factores mecánicos y técnicos. • Homogeneizar la muestra con EDTA. • Llenar la pipeta de Eritrosedimentacion(Westergren) con la muestra hasta la marca del O(cero) con una propipeta • Colocar la pipeta en el soporte de eritrosedimentación y anotar la hora.

Causas de error – la temperatura altera la VSG e incluso una ligera inclinación de la pipeta – Los transtornos hemáticos como cell falsiformes y los esferocitos impiden la formación de los rodillos por lo tanto disminuye la VSG. – Los oxalatos y la heparina hace q los eritrocitos se contraigan y produce valores elevados falsos de VSG.