Heme group Primary structure Secondary structure Tertiary structure

  • Slides: 55
Download presentation

Heme group Primary structure Secondary structure Tertiary structure http: //www. rpi. edu/dept/chem-eng/Biotech-Environ/PRECIP/precpintro. html Quaternary

Heme group Primary structure Secondary structure Tertiary structure http: //www. rpi. edu/dept/chem-eng/Biotech-Environ/PRECIP/precpintro. html Quaternary structure การละลายนำของโปรตนขนกบโครงสรางโมเลกล วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 10

กลไก/หลกการทำให โปรตน ตกตะกอน(ไมละลายนำ • Isoeletric Precipitation changing the p. H of the protein solution

กลไก/หลกการทำให โปรตน ตกตะกอน(ไมละลายนำ • Isoeletric Precipitation changing the p. H of the protein solution • Use of an Organic Solvent for Precipitation นำ (H 2 O) ชอบจบกบ hydrophilic surfaces ของโป Organic solvent ชอบจบกบ hydrophobic surfaces ของโปรตน Organic solvent ทำให ลดลง วสทธ กงวานตระกล dielectric constant of the medium กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 12

S is the solubility of the protein in the organic solvent Sw is the

S is the solubility of the protein in the organic solvent Sw is the solubility in water D is the dielectric constant of the medium when organic solvent is added Dw is the dielectric constant of the water R is the gas constant T is the absolute temperature A is a constant วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 13

กลไก/หลกการทำให โปรตน ตกตะกอน(ไมละลายนำ • Addition of a non-ionic polymer or metal ions dextrans and

กลไก/หลกการทำให โปรตน ตกตะกอน(ไมละลายนำ • Addition of a non-ionic polymer or metal ions dextrans and polyethylene glycols reduce the amount of water available to interact with the protein Mn 2+, Fe 2+, Co 2+, Ni 2+, Zn 2+, and Cd 2+ will bind strongly to carboxylic acids and to nitrogenous compounds Ca 2+, Ba 2+, Mg 2+, and Pb 2 will mainly bind to carboxylic acids Ag+, Hg 2+, and Pb 2+ will bind strongly to sulhydryl groups วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 15

ชนด โครมาโทกราฟ Mobile Stationary phase Liquid Gas Liquid Solid Liquid • • • จำแนกตาม

ชนด โครมาโทกราฟ Mobile Stationary phase Liquid Gas Liquid Solid Liquid • • • จำแนกตาม phase ทใช Liquid chromatography (LSC) Gas Liquid chromatography (GLC) Liquid liquid chromatography (LLC) จำแนกตามกลไกการแยก Adsorption chromatography Partition chromatography Ion exchange chromatography Gel filtration chromatography Affinity chromatography วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 30

Adsorption chromatography ทศทางการเคลอนทของ stationary phase ดดซบกบ Stationary phase Alumina Silica gel Fluorisil (magnesium silica)

Adsorption chromatography ทศทางการเคลอนทของ stationary phase ดดซบกบ Stationary phase Alumina Silica gel Fluorisil (magnesium silica) Solute 1 Solute 2 mobile phase Mobile phase Stationary phase มกมสภาพขว solute 1 และ solute 2 ไดตางกน Use for separate Small organic compounds and lipids Amino acid, lipids, carbohydrate Medium size Lipids Calcium phosphate Protein, polynucleotides (hydroxyapatite) วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 31

http: //www. hmds. org. uk/figures/fitc_sep. jpg http: //genchem. wisc. edu/demonstrations/Images/23 biochem/sizeexclusion. jpg วสทธ กงวานตระกล

http: //www. hmds. org. uk/figures/fitc_sep. jpg http: //genchem. wisc. edu/demonstrations/Images/23 biochem/sizeexclusion. jpg วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 36

Type of electrophoresis แบงตามชนดของตวกลางคำจน Paper electrophoresis Cellulose electrophoresis Starch gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis

Type of electrophoresis แบงตามชนดของตวกลางคำจน Paper electrophoresis Cellulose electrophoresis Starch gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis Polyacrylamide gel electrophoresis Polyacylamide gel เกดจากการ cross-link ของ acrylamide กบ methylene-bis acrylamide โดยม ammonium persulfate เปน ตวเรง และ TEMED เปนตวทำใหเกดอนมลอสระเพอเรมตนปฏกรย cross-link วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 46

Polyacrylamide gel electrophoresis (Discontinuous electrophoresis) http: //web. siumed. edu/~bbartholomew/images/chapter 6/F 06 -21. jpg วสทธ

Polyacrylamide gel electrophoresis (Discontinuous electrophoresis) http: //web. siumed. edu/~bbartholomew/images/chapter 6/F 06 -21. jpg วสทธ กงวานตระกล กลมวชาเคมคลนก สายวชาเทคนคการแพทย ม. ข. 52