Hal akut toxicitsi teszt OECD 203 Ksztette Pomucz
- Slides: 19
Hal akut toxicitási teszt (OECD 203) Készítette: Pomucz Anna Boglárka Gruiz Katalin Környezettoxikológia előadásához
Teszt jellemzése A teszt során halakat használunk a vízhez adott, vizsgálni kívánt minta toxicitásának teszteléséhez. A mérés végpontja, a halak pusztulása illetve túlélése. A vizsgálat időtartama 96 óra.
A teszthez ajánlott fajok Név Latin név Ajánlott tesztelési hőmérséklet (°C) zebradánió Brachydanio rerio 21– 25 2, 0 + 1, 0 ponty féle Pimephales promelas 21– 25 2, 0 + 1, 0 ponty féle Cyprinus carpio 20– 24 3, 0 + 1, 0 rizshal Oryzias latipes 21– 25 2, 0 + 1, 0 szivárványos guppi Poecilia reticulata 21– 25 2, 0 + 1, 0 kékkopoltyús naphal Lepomis macrochirus 21– 25 szivárványos pisztráng* Oncorhynchus mykiss 13– 17 2, 0 + 1, 0 Ajánlott fajok * Kezdőoldali képen A teszteléshez használt halak ajánlott teljes testhossza (cm) 5, 0 + 1, 0
Zebrahal, Brachydanio rerio Forrás: http: //blogs. nature. com/nm/spoonful/2008/03/
A teszthal A vizsgálatokhoz egy vagy több faj is alkalmazható. A teszthez használt halfajtákat gyakorlati kritériumok alapján érdemes megválasztani: egész évben könnyen beszerezhető legyen, problémamentesen fenntartható legyen, a vizsgálat céljainak megfelelő legyen, továbbá figyelembe kell venni minden olyan gazdasági, biológiai vagy ökológiai tényező, amelynek bármilyen hatása lehet. A halaknak jó egészségi állapotban kell lenniük, és mindenfajta látható testi hibától mentesnek kell lenniük
A teszthal 2. A halakat legalább 12 nappal a vizsgálat megkezdése előtt be kell szerezni és a laborban fenntartani. A vizsgálatot megelőző hét napban olyan minőségű vízben kell tartani a halakat, amilyenben a teszt is zajlani fog és az alábbi feltételeknek kell teljesülni: • világítás: napi 12– 16 órás megvilágítás, • hőmérséklet: az adott fajnak megfelelő • oldott oxigén koncentrációja: a levegőtelítettségi érték legalább 80 %-a, • etetés: háromszor hetente vagy naponta, 24 órával a teszt megkezdése előttig
Szivárványos guppifajták: Poecilia reticulata Forrás: http: //diszhalak-oldala. hupont. hu/11/megtobb-kep
Méréshez szükséges készülékek Minden készüléket kémiailag inert anyagból kell készíteni: • oxigénmérő, • vízkeménység meghatározására szolgáló berendezés, • megfelelő készülék a hőmérséklet szabályozásához.
Hasznos információk a vizsgált anyagról • • az anyag vízoldékonysága gőznyomása kémiai szerkezete az anyag tisztasága kémiai stabilitása disszociációs állandói biológiai lebonthatósága A fentiek fontos információk annak érdekében, hogy a legmegfelelőbb vizsgálati módszert lehessen kiválasztani (statikus, félstatikus vagy átfolyásos módszer) és a vizsgálat időtartama alatt a vizsgált anyag kielégítően állandó koncentrációja biztosítható legyen.
Vizsgálat érvényessége Ahhoz, hogy a vizsgálat érvényes legyen, a következő feltételeknek kell teljesülniük: • A kontrollcsoportban a kísérlet végéig a halpusztulásnak nem szabad 10%-nál nagyobbnak lennie (vagy maximum egy hal pusztulhat el, ha tíznél kevesebb halat használnak). • Állandó feltételeket kell fenntartani amennyire csak lehet az egész vizsgálat során, és ha szükséges, félig statikus vagy átfolyásos eljárásokat kell alkalmazni. • Az oldott oxigén koncentrációjának mindvégig nagyobbnak kell lennie, mint a levegőtelítettségi érték 60%-a. • A vizsgált anyag koncentrációit a kísérlet során mindvégig a kezdeti koncentráció 80%-án belüli értéken kell tartani.
Kékkopoltyús naphal: Lepomis macrochirus Forrás: http: //www. cacaponriver. org/newsletter 2003 -3. htm
A vizsgálat menete
Alkalmazandó módszer meghatározása Típusát tekintve háromféle eljárás használható: • Statikus vizsgálat: Ez olyan toxicitásvizsgálat, amelyben a vizsgált oldat nem áramlik (az oldatok mindvégig változatlanok maradnak). • Félstatikus vizsgálat: A vizsgált oldat áramlása nélküli vizsgálat, amelynél rendszeresen, adagonként ki kell cserélni a vizsgált oldatokat hosszabb időtartamok (pl. : 24 óra) eltelte után. • Átfolyásos vizsgálat: Olyan toxicitásvizsgálat, amelyben a vizet állandóan cserélik a vizsgálati kamrákban.
Hígítási sor elkészítése El kell készíteni a szükséges erősségű törzsoldato(ka)t majd a vizsgálni kívánt koncentrációkat a törzsoldat hígításával kell elkészíteni. A hígításhoz használható jó minőségű természetes víz vagy művíz illetve ivóvíz is, melynek keménysége 10 és 250 mg/l közötti (Ca. CO 3 ra meghatározva), p. H-ja pedig 6, 0 és 8, 5 között van. Ultrahangos diszpergálás, szerves oldószerek, emulgeáló- vagy diszpergálószerek használhatók alacsony vízoldékonyságú anyagok törzsoldatainak elkészítéséhez. Valamilyen segédanyag használata esetén, a kontrollhalakat is ki kell tenni a segédanyag ugyanolyan koncentrációjának, mint amelyet a vizsgálati sorozatokban alkalmaztunk. Segédanyag maximum koncentrációja: 100 mg/liter a vizsgált közegben. A vizsgálatot a p. H-érték beállítása nélkül kell végrehajtani. Ha létezik bizonyíték a p. H-érték jelentős változására, ajánlatos a vizsgálat megismétlése a p. H-érték beállításával.
Teszt-körülmények • Teszt időtartam: 96 óra, • állatok száma: koncentrációnként és a kontrollban is legalább 7 egyed • egyedsűrűség: 1 g hal/liter ajánlott a statikus és a félstatikus vizsgálatokhoz; az átfolyásos rendszerekhez elfogadható ennél nagyobb egyedsűrűség is • vizsgált koncentráció: legalább 5 olyan koncentráció esetén szükséges a vizsgálat, amelyek mértani sorozatának tényezője nem haladja meg a 2, 2 -et és szükséges a kontroll minta vizsgálata is • világítás: 12– 16 órás megvilágítás naponta, • hőmérséklet: a használt fajtáknak megfelelő, de minden esetben ± 1 °C-on belül, • oldott oxigén koncentrációja: a levegőtelítettségi érték nem kevesebb, mint 60 %-a, levegőztetés használható, ha nem okoz veszteséget a vizsgált anyag mennyiségében • etetés: nincs • zavarás: a halak viselkedését befolyásoló tényezőket ki kell zárni.
Észrevételek A halakat a teszt megkezdését követő 3. és 6. órában, majd 24. , 48. , 72. és 96. órában meg kell vizsgálni, a pusztulásokat feljegyezni és az elpusztult halakat el kell távolítani. A halak akkor tekinthetők élettelennek, ha a farokúszó érintése nem vált ki reakciót, és nem látható semmilyen mozgás. Nyilvántartást kell vezetni a látható rendellenességekről (például egyensúlyvesztés, az úszási viselkedés és a légzés változásai, pigmentáció stb. ). Naponta mérni kell a p. H-értéket, az oldott oxigén koncentrációt és a hőmérsékletet.
Adatok értékelése Minden olyan időtartamhoz, amikor fel lettek jegyezve megfigyelések (24, 48, 72 és 96 óra) meg kell határozni a kontrollhoz viszonyított százalékos pusztulásokat, majd ezt a koncentráció logaritmusának függvényében fel kell rajzolni. H=pusztulási/letlitási százalék(%) N k=a kontrollban életben maradt állatok száma(db) Nminta =a mérendő mintában életben maradt állatok száma (db) Minden egyes megfigyelési időhöz meg kell becsülni az LC 50 et (50%-os pusztuláshoz tartozó koncentráció) és a hozzá tartozó (p=0, 95) megbízhatósági tartományt.
Rizshal és rizshal-embriók: Oryzias latipes Forrás: http: //www. biol. s. u-tokyo. ac. jp/users/hassei/English/research%20 E. html
Forrás: • OECD GUIDELINE FOR TESTING OF CHEMICALS 203 – Fish, Acute Toxicity Test Kép: • http: //1. bp. blogspot. com/_Aam. NOes. Lv. Q/SXe. Icw. Holt. I/AAAAACM/bvmp Pv. TKq 4 o/s 320/Szivárványos+pisztráng. png
- Perhatikan hal-hal berikut.
- Uraikan ruang lingkup dari layout toko
- Salah satu contoh gambar cerita adalah
- Hal-hal yang esensial dalam membuat lagu
- Bab 1 pengantar akuntansi dan perusahaan
- Hal-hal yang bisa diobservasi secara audial adalah… *
- Hal-hal yang perlu diinquiry dalam tes rorscach kecuali
- Sebutkan 5 etika bertelepon
- Maksud perkara berbangkit dalam agenda mesyuarat
- Hal-hal yang harus diperhatikan dalam menulis teks iklan,
- Pengumuman biasanya memuat hal hal yang sifatnya
- Contoh data movement
- Perhatikan hal-hal berikut.
- Sebutkan hal-hal yang diperlukan dalam membuat puisi
- Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam kemasan produk adalah
- Sebutkan hal-hal yang dicantumkan dalam surat pesanan
- Kognitív disszonancia teszt
- Probono.uni-nke.hu belépés
- Johari ablak teszt
- Kofa 3 teszt