Hafta XII PCR Temelli Genetik Analiz Yaklaşımları DNA FRAGMENT ANALİZİ Prof. Dr. Hilâl Özdağ
DNA FRAGMENT ANALİZİ Ø STR/SSR/Microsatellit Analizi Ø Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) Ø Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) Ø Loss of Heterozygosity (LOH) Ø MI (Microsatellite Instability) Ø SNP Genotipleme
DNA FRAGMENT ANALİZİ Ø Boy tayini Ø Agaroz jel elektroforezi Ø Agaroz Ø Nu. Sieve Ø Metaphor Ø Poliakrilamid jel elektrofezi Ø Kapiller elektroforez Ø Genetik analizör (Otomatik DNA Dizi Analiz Sistemi) Ø Qiagen Egene Ø Agilent Bioanalyzer
DNA FRAGMENT ANALİZİ Ø Boy tayini Ø Agaroz jel elektroforezi Ø Agaroz Ø Nu. Sieve Ø Metaphor Johnson N et al, BMC Med Gen. , 2004, 5 http: //www. med. yale. edu/genetics/ward/tavi/p 15. html
DNA FRAGMENT ANALİZİ Ø Boy tayini Ø Agaroz jel elektroforezi/PAGE http: //www. med. yale. edu/genetics/ward/tavi/p 15. html
DNA FRAGMENT ANALİZİ Ø Boy tayini Ø PAGE ANALYTICAL BIOCHEMISTRY 253, 130– 132 (1997) http: //www. med. yale. edu/genetics/ward/tavi/p 15. html
DNA FRAGMENT ANALİZİ Kapiller Elektroforez Genetik Analizör
DNA FRAGMENT ANALİZİ Kapiller Elektroforez Genetik Analizör STR/Microsatellite Analysis RFLP/AFLP/TRFLP
DNA FRAGMENT ANALİZİ 10 pleks
DNA FRAGMENT ANALİZİ Fragment boylarının tespiti
DNA FRAGMENT ANALİZİ Elektroferogramların karşılaştırılması
DNA FRAGMENT ANALİZİ LOH Heterozigot PCR
DNA FRAGMENT ANALİZİ LOH
DNA FRAGMENT ANALİZİ QIAxcel/EGene Ø 0. 5 kb’den küçük fragmentler için 3 -5 bç’ine dek ayırım sağlar. Ø Hazır kapiller kartuşlarının içindeki polimerin içinde çok düşük konsantrasyonda Et. Br bulunmaktadır. Ø %2 agaroz Aynı anda 96 örneğe kadar analizi gerçekleştirmek mümkündür. Ø Sistemde RNA analizi yapmak da mümkündür.