H 1 N 1 mikrobiolgiai diagnosztikai gondjai Kovcs

H 1 N 1 mikrobiológiai diagnosztikai gondjai Kovács Ida Jusztina Gyógyszerhatástani és Biofarmáciai Intézet, SZTE; ÁNTSZ Da. RI Szeged

Bevezetés Az influenza szó olaszul befolyást jelent. A „spanyolnátha” -járvány (1918) hívta fel a betegségre az emberiség figyelmét. l A vírustaxonómia ezeket a vírusokat az Orthomyxovirus családba sorolja. l Az influenza kórokozói – az A, B és a C influenzavírusok – cseppfertőzéssel terjednek. A betegség a légutakban zajlik. Kiterjedt járványokat, pandémiákat az A vírus okoz. l Az A vírusok felszíni struktúráját két antigén határozza meg, a hemagglutinin (H) és a neuraminidáz (N). A H antigén döntő szerepet játszik a vírus patogenitásában is. l

A/2009/California/H 1 N 1, az új vírustörzs Antigén „drift” (antigénsodródás) és „shift” (antigénugrás) l Az influenza A/H 1 N 1 v különlegesnek számít, mert négy különbözô influenzavírusból (madár, ember, amerikai sertés és eurázsiai sertés vírusából) származnak az RNS elemei. l A sertésinfluenza elnevezés helytelen. l

A/2009/California/H 1 N 1, az új vírustörzs l 2009. 21. -2010. 12. hét között 9 424 betegnél történt virológiai vizsgálat influenzavírus kimutatása céljából. l A pandémiás H 1 N 1 variáns által okozott, ismertté vált megbetegedések kumulatív száma 2 153. l Az influenza A(H 1 N 1)v fertőzéssel összefüggésbe hozható halálesetek regisztrált száma 133. /OEK/

Az influenza A/H 1 N 1 v klinikai tünetei: • • Láz Köhögés Torokfájás Orrfolyás Fejfájás, izom- és ízületi fájdalmak Hidegrázás Fáradtság Az esetek 25%-ban hányás és 30%-ban hasmenés társul a tünetekhez, ami magasabb a hagyományos influenzánál észlelteknél

Mennyi ideig fertőznek a betegek? l Az influenzás betegeket fertőzőnek kell tekinteni a tünetek kialakulását megelőző naptól a betegség kezdetétől számított 7 napig. l A fertőzőképesség a betegség első három napján a legnagyobb. l Gyermekek, különösen a csecsemők és az immunhiányos betegek hosszabb ideig is fertőzőképesek lehetnek! l Az új influenza vírussal fertőzöttek 80%-a 50 év alatti! l A kórházba kerülők alig 5%-a 65 év feletti.

Influenza A/H 1 N 1 v diagnosztikai lehetőségei l l l Vírusok illetve virális antigének direkt kimutatása Vírusizolálás és a vírusszaporodás kimutatása A vírussal szembeni immunválasz vizsgálata - vírusszerológia Molekuláris módszerek (r. RT-PCR) Klinikai kép + járványügyi adatok

Influenza A/H 1 N 1 v által okozott megbetegedés esetdefiníciója l Klinikai feltételek – Láz ÉS az akut légúti fertőzés jelei és tünetei – Pneumónia / súlyos légúti megbetegedés – haláleset, mely ismeretlen kórokú akut légúti megbetegedést követően alakult ki Laboratóriumi feltételek A következő vizsgálatok közül legalább eggyel igazolt az új A/H 1 N 1 influenzavírus jelenléte: l – – – RT-PCR vizsgálat a vírus tenyésztése vírusszerológia

Influenza A/H 1 N 1 v által okozott megbetegedés esetdefiníciója Epidemiológiai feltételek A megbetegedés kezdetét megelőző 7 napon belül legalább egy az alábbi három közül: - Az a személy, aki szoros kontaktusban volt a laboratóriumi vizsgálattal igazoltan az új influenza A (H 1 N 1) vírus által előidézett megbetegedésben szenvedő beteggel. - Az a személy, aki olyan területen járt ahol az új influenza A (H 1 N 1) vírus az emberek között terjed. - Az a személy, aki az új influenza A (H 1 N 1) vírus kimutatását végző laboratóriumban dolgozik. l

Virusok illetve virális antigének direkt kimutatása (IFA) Előnye: – Gyorsaság (2 -4 óra), – Olcsó – Jól levett, kehelysejteket tartalmazó minta szükséges!!! – Kritikus a mintavétel ideje!! l Hátránya: – Az értékelés nagy tapasztalatot igényel – Nem alkalmas annak megállapítására, hogy mely vírustörzs van jelen – Kevésbé érzékeny – Szükség lehet az eredmény más módszerrel történő megerősítésére l

Influenza gyorstesztek

Vírusizolálás: tojás, sejtkultúra (3 -10 nap) – Infektív vírusok izolálására csak élő rendszerek, szövettenyészetek, élő állatok ill. embrionált tojás alkalmas. – Az eljárás előnye, hogy alkalmas annak megállapítására, mely vírus (A, B vagy más vírus) és mely vírustörzs van jelen. – Nem minden laboratórium esetében elérhető módszer. – A módszer fő hátránya, hogy az eredményig több nap telhet el.

Real-time RT-PCR „CDC protocol” Lehetőség: • Házi módszer • Gyári Kitek l Előny: • Gyors, Specifikus, Érzékeny l Hátrány: • „legköltségesebb módszer” l Fals negatív eredmények születhetnek • Mintavétel időpontja! • Nem megfelelő mintavétel!! • Nem megfelelő minta tárolás!! l

„Az ember kötelessége csak ott ér véget, ahol a lehetetlen kezdődik. ” /Louis Pasteur/