GUA de Lab A Q GRADOFARMACIA Salvador Sagrado

GUÍA de Lab. A. Q. GRADO-FARMACIA Salvador Sagrado sagrado@uv. es Dpto. Q. Analítica (Farmacia) TAREAS EVALUABLES (SE VALORARA LA FECHA DE ENTREGA) - Previo al Lab (Entregables al comenzar las prácticas) [1] Cuestiones (Leer la introducción del cuadernillo de prácticas en pdf. y acceder a los enlaces allí indicados. Hacer el cuestionario on-line en aula virtual) [2] Esquemas prácticas 1, 3, 4 y 5 (presentar el 1 er día, según modelo para la práctica 2, resuelto al final del cuadernillo). El prof. Lo valorará y devolverá. - Sesiones experimentales (Laboratorio). Breve explicación + 5 sesiones prácticas [3] Informe parcial-resultados. Al final de cada día/práctica presentar al prof. el borrador cumplimentado (tras los cálculos) del informe (al final del cuadernillo). El prof. lo valorará in situ. - Posterior al Lab. Sesión seminario post-prácticas: [1] Desarrollo Prácticas (discusión grupal participativa. El prof. valorará in situ la participación activa, sobre todo el cuadernillo, el experimental, los esquemas) [2] Presentación Informe (discusión grupal participativa. El prof. valorará in situ la participación activa sobre los resultados del informe en el cuadernillo) [3] Informe-resultados (Entrega del informe, hoja de informe suelta-impresa aparte. El prof. valorará posteriormente los resultados de dicha hoja) ------------Calificación final: Examen [1] 30% + Memoria [2] 20% + Resultados [3] 50%

ANÁLISIS ANALITOS MUESTRAS TÉCNICA (método) 1) DUREZA (Ca, Mg) AGUA VOLUMETRÍA (complejos) 2) N-acetíl-L-cisteína MEDICAMENTO ESPECTROFOTOMETRÍA (Vis. ) 3) FLUORURO DENTÍFRICO POTENCIOMETRÍA 4) Ca MEDICAMENTO ABSORCIÓN ATÓMICA 5) PARACETAMOL ASPIRINA CAFEÍNA MEDICAMENTO HPLC

ORGANIZACIÓN PRACTICAS: ANÁLISIS ANALITOS Parejas MUESTRAS días exp. 1º 2º 3º 4º 5º 7, 8 5, 6 3, 4 7, 8 5, 6 1) DUREZA (Ca, Mg) AGUA 1, 2 2) N-acetíl-L-cisteína MEDICAMENTO 3, 4 1, 2 3) FLUORURO DENTÍFRICO 5, 6 3, 4 1, 2 4) Ca MEDICAMENTO 7, 8 5, 6 3, 4 1, 2 5) PARACETAMOL ASPIRINA CAFEÍNA MEDICAMENTO 7, 8 5, 6 3, 4 7, 8 1, 2

INFORME (por pareja) Ejemplos. . . y algunos datos esperables Pedir al profesor junto con la muestra o patrón-verificación PRÁCTICA (ANALITO) DUREZA Muestra: Agua ETAPA (Código) (Resultado previsto, unidades) MUESTRA Dm. 750 -1350 mg. L-1 Ca. CO 3 Verificar N-acetíl-L-cisteína Muestra: Medicamento RESULTADOS (Completar. Media y s con cifras significativas) INCIDENCIAS (código) (Describir por detrás) Media ±s = 1230 RSD(%) = ± 50 (Verificado) <5% ; n= . Nº patrones de Calibrado: 5 ó (justificar) CALIBRACIÓN VERIFICACIÓN Nv 10 -40 % np = 5 (o incidencia). MUESTRA Nm. Fabricante mg/unidad ; R 2= >0. 99 Media ±s = RSD(%) = ; n = 3 (o incidencia) Media ±s = RSD(%) = ; n= INCIDENCIAS: N 1. Eliminación de 1 patrón de calibrado por que se alejaba de la recta de calibrado, por lo que np= 4 N 2 Eliminación de 1 réplica de la muestra discrepante por que superaba el ensayo Q, por lo que n = 2 N 1 N 2 .

CÁLCULOS (ver Guía en Cuaderno de prácticas): Opcionalmente o para verificar. . . HOJA EXCEL statreg. xls (ordenadores prácticas) - Calibrado + interpolación - Media ± s, RSD%, n (+ ensayo Q)

Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Calibración del método (instrumental) - Patrón (p): NAC (puro, desecador) Protocolo operativo (Equipos) … sólo para cálculos (ver NOTA) Datos primarios [Ap- 5. 2] Pesar con precisión en balanza analítica 0. 010 g de N-acetíl-Lcisteína… enrasar a 250 m. L con agua. (aforado) mp Vp ~[0. 01] g =0. 25 L [Ap- 6. 1] Tomar alícuotas de la disolución de N-acetíl-L-cisteína de 0 a 5 m. L (por ejemplo, 0, 1, 2, 3, 4 y 5 m. L) (pipeta grad. ) e introducir en matraces de 25 m. L. (aforado). . . vi vp =[0 – 5] m. L =25 m. L NOTA: mirar el procedimiento completo (cuadernillo) para ver el resto de reactivos a añadir Esquema Marcar (rotular) material 0 seco * Cp 1 vi Cp mp ‘Recta de calibrado’: Blanco, ‘Cero’ instrumento Ap 1 Api Vp Cpi(mg/L) mp : masa de patrón Vp : volumen disolución patrón (madre) vi : volumen alícuotas patrón (alícuotas i ) vp: volumen disolución patrones calibrado Cpi : concentración patrones calibrado (mg/L) Api : absorbancia patrones calibrado vp Cp 5 Ap 5 Informe np=5 (R 2 >0. 99)

Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Verificación del método (instrumental) - Patrón verif. (pve); [20 -30%]-Analito (a): NAC Protocolo operativo (Equipos) … sólo para cálculos (ver NOTA) Datos primarios [Ap- 6. 2] Pesar en balanza analítica 0. 04 g del patrón de verificación… enrasar a 100 m. L con agua (aforado). Por triplicado, tomar 1 m. L (pipeta grad. ) de esta disolución, trasvasar a un aforado de 25 m. L … mpve Va vi va ~[0. 04] g =0. 1 L =1 m. L =25 m. L NOTA: mirar el procedimiento completo (cuadernillo) para ver el resto de reactivos a añadir Esquema Marcar (rotular) material seco * mpve Ca-pvei (%) ? Interpolar en ‘Recta de calibrado’: Ca ma Aa 1 vi Ca 1 Va mpve : masa de patrón-verif. Va: volumen disolución analito-pve (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) Ca-pvei : concentración de analito en el pve (%); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) Aai va Cai Aa 3 Cai

Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Análisis de muestra (m) - Analito (a): NAC (contenido según fabricante) Protocolo operativo (Equipos) … sólo para cálculos (ver NOTA) Datos primarios [Ap- 6. 3] Pesar en balanza analítica el contenido de un sobre o mc cápsula. Triturar en un mortero. Pesar 0. 125 g de muestra… llevar m m a 250 m. L en un matraz aforado. Por triplicado, tomar 1 m. L de esta Va disolución, trasvasar a un aforado de 25 m. L… vi Va ~[0. 125] g =0. 25 L =1 m. L =25 m. L NOTA: mirar el procedimiento completo (cuadernillo) para ver el resto de reactivos a añadir Esquema Marcar (rotular) material seco * mc Interpolar en ‘Recta de calibrado’: mm ma-c (mg/unid. ) ? Ca ma Aa 1 vi Ca 1 Va mc : masa de comprimido mm : masa de muestra Va: volumen disolución analito-muestra (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) ma-ci : masa de analito por comprimido (mg/unid. ); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) Aai va Cai Aa 3 Cai

Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Calibración del método (instrumental) - Patrón (p): NAC (puro, desecador) Protocolo operativo (Equipos) Datos primarios [Ap- 5. 2] Pesar con precisión en balanza analítica 0. 010 g de N-acetíl-Lcisteína… enrasar a 250 m. L con agua. (aforado) mp Vp ~[0. 01] g =0. 25 L [Ap- 6. 1] Tomar alícuotas de la disolución de N-acetíl-L-cisteína de 0 a 5 m. L (por ejemplo, 0, 1, 2, 3, 4 y 5 m. L) (pipeta grad. ) e introducir en matraces de 25 m. L. (aforado). . . vi vp =[0 – 5] m. L =25 m. L Cálculo Cpi (mg/L) = mp(g) / Vp(L) x 103(mg) / 1(g) x vi(L) / vp(L) = (mp(g) 103 vi(L)) / (Vp(L) vp(L)) 0 * Cp 1 vi Cp mp ‘Recta de calibrado’: Blanco, ‘Cero’ instrumento Ap 1 Api Vp Cpi(mg/L) mp : masa de patrón Vp : volumen disolución patrón (madre) vi : volumen alícuotas patrón (alícuotas i ) vp: volumen disolución patrones calibrado Cpi : concentración patrones calibrado (mg/L) Api : absorbancia patrones calibrado vp Cp 5 Ap 5 Informe np=5 (R 2 >0. 99)

Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Verificación del método (instrumental) - Patrón verif. (pve); [20 -30%]-Analito (a): NAC Protocolo operativo (Equipos) Datos primarios [Ap- 6. 2] Pesar en balanza analítica 0. 04 g del patrón de verificación… enrasar a 100 m. L con agua (aforado). Por triplicado, tomar 1 m. L (pipeta grad. ) de esta disolución, trasvasar a un aforado de 25 m. L … mpve Va vi va Cálculo Ca-pvi (%) = 100 ma(g) / mpve(g) = (Cai(mg/L) x va(L) / vi(L) x Va(L) x 1(g) / 103(mg)) / mpve(g) = (Cai(mg/L) va(L) Va(L)) / (vi(L) 10 mpve(g)) * mpve Ca-pvei (%) ? ~[0. 04] g =0. 1 L =1 m. L =25 m. L Interpolar en ‘Recta de calibrado’: Ca ma Aa 1 vi Ca 1 Va mpve : masa de patrón-verif. Va: volumen disolución analito-pve (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) Ca-pvei : concentración de analito en el pve (%); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) Aai va Cai Aa 3 Cai

Práctica 2. N-acetíl-L-cisteína (NAC) Análisis de muestra (m) - Analito (a): NAC (contenido según fabricante) Protocolo operativo (Equipos) Datos primarios [Ap- 6. 3] Pesar en balanza analítica el contenido de un sobre o mc cápsula. Triturar en un mortero. Pesar 0. 125 g de muestra… llevar m m a 250 m. L en un matraz aforado. Por triplicado, tomar 1 m. L de esta Va disolución, trasvasar a un aforado de 25 m. L… vi Va Cálculo ma-ci (mg/unid. ) = ma(mg) x mc(g) / mm(g) = (Cai(mg/L) x va(L) / vi(L) x Va(L) ) x mc(g) / mm(g) = (Cai(mg/L) va(L) Va(L) mc(g) ) / (vi(L) mm(g)) * mc ~[0. 125] g =0. 25 L =1 m. L =25 m. L Interpolar en ‘Recta de calibrado’: mm ma-c (mg/unid. ) ? Ca ma Aa 1 vi Ca 1 Va mc : masa de comprimido mm : masa de muestra Va: volumen disolución analito-muestra (madre) vi : volumen alícuotas (réplicas i ) va: volumen disolución analito (réplicas) ma-ci : masa de analito por comprimido (mg/unid. ); incógnita Aai : absorbancia analito Cai : concentración estimada analito (mg/L) Aai va Cai Aa 3 Cai

Ejemplo de Registro de ensayo (basado en los esquemas y cálculos)