Gentica de los sndromes de muerte sbita en
Genética de los síndromes de muerte súbita en niños mexicanos Dr. Pedro Iturralde Torres
Molecular
FAF DAVD ST DNS SQTL MCD Canalopatías Cardiacas TVPC SQTC SBr DCC SAT
Protocolo de Investigación • Estudiar 17 familias mexicanas con SQTL y alto riesgo de muerte súbita • Identificar familias mexicanas con genes nuevos • Identificar nuevas mutaciones • Estudiar el efecto funcional de las mutaciones encontradas
Arbol Familiar Alternancia onda T 35 años 8 años Bloqueo AV 2: 1 Muerte Súbita QTc: 712 ms Probando – Femenino 21 meses
Taquicardia Helicoidal
Técnicas para el Dx Genético Gen 5’ E 1 E 2 E 3 Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) E 2 Alelo Paterno E 2 Obtención DNA Billones de Copias E 5 Muestra Sanguínea Alelo Materno Producto de PCR E 4 E 2 3’
Plataforma de. Diagnóstico Detección Intermedia Genético Secuenciación Cromatografía Líquida Desnaturalizante de Alto Rendimiento Gen (DHPLC) Paciente 2 Paciente 1 E 2 E 1 Normal 5’ E 3 E 4 E 5 Mutación PCR Patient 2 Patient 1 Alelo Materno E 2 CGGGCCCGCGGAGGAGCGGC GGA Alelo Paterno E 2 Productos PCR Perfíl Normal Gly Val GGA CGGGCCCGCGGAGGAGCGGC T Anormal Perfíl 3’
QTc: 712 ms
Canales afectados con mayor frecuencia en el SQTL Corriente de Sodio Corriente de Potasio IKS Corriente de Potasio IKR
Fenotipo de SQTL 3 • Segmento ST largo. Onda T angosta y de inicio tardío asociado a mutaciones en SCN 5 A • Bloqueo AV 2: 1 asociado a mutaciones en: SCN 5 A, HERG y CACNA 1 Lupogazoff et al. Circ Res 89: e 16 -e 21, 2001 Splawski et al. Cell 119: 19 -31, 2004 Hoorntje et al. Circulation 100: 1264 -1267, 1999 Zhang et al. Circulation 102: 2849 -2855, 2000
Canal de Sodio Nav DI DII NH 3 DIII DIV COOH SCN 5 A (Cr 3 p 21 -24) codifica Na. V 1. 5, 2015 -2016 AA
Topología linear del Nav
Subunidades β de canal de sodio Gen SCNB 1 SCNB 2 SCNB 3 SCNB 4 Proteina Cr Nav 1 Nav 2 Nav 3 Nav 4 19 11 11 11 #AA 268 AA 215 AA 228 AA
Dominio Mutacional. Dominio Análisis Transmembranal C-Terminal Dominio N-Terminal SCN 4 B (Ch 11 q 23. 3) AA 1 -163 1 Extracelular 1 2 4 3 Bloqueador Normal Nav 1. 5 AA 186 -228 AA 186 -197 Apertura Canal Nav - N 1 AA 164 -185 L 179 F Ank B Na+ 5 C 228 Apéndice Citoplasma
Resultados L 179 F ausente en 800 alelos de referencia • • 400 Mexicanos Mestizo • 200 Caucasicos 200 Afro-Americanos
Estudios de Expresión L 179 F- 4 fue construída por mutagénesis dirigida y expresada en forma heteróloga en células HEK 293 conteniendo en forma estable SCN 5 A 1 n. A 2. 5 ms SCN 5 A+ 4 WT 1 n. A 2. 5 ms SCN 5 A+ 4 L 179 F 1 n. A 2. 5 ms
SCN 5 A, canal Nav 1. 5
Resultados Se encontró una nueva mutación en SCN 4 B, ausente en 800 alelos de referencia La mutación co-segrega con la enfermedad. - Autosómica dominante con penetrancia incompleta - Los estudios in vitro muestran incremento en la corriente tardía del canal de sodio, similar al SQTL 3. Medeiros A. Circulation 2007; 116: 134 -142.
LQT 9 Ch 3 p 25 CAV 3 < 1% ST 1 Ch 12 p 13. 3 CACNA 1 C < 1% SAT 1 Ch 17 q 23 KCNJ 2 <1% SQTL 10 SQTL 1 Ch 11 q 23. 3 SCN 4 B <1% Ch 11 p 15. 5 KCNQ 1 30 -35% SQTL 2 Ch 7 q 35 -36 KCH 2 25 -30% SQTL 3 Heterogeneidad Genética Proteínas Auxiliares Ch 3 p 21 -24 Canales Iónicos En el SQTL de Canales Iónicos SCN 5 A 5 -10% SQTL 6 SQTL 5 Ch 21 q 22 KCNE 2 <1% Ch 21 q 22 KCNE 1 <1% SQTL 4 Ch 4 q 25 -27 ANK 2 < 1% Tester … Ackerman. Heart Rhythm 2: 507 -517, 2005
Iturralde P. J Cardiovasc Electrophysiol 2008; 1 -6.
L 1821 del/10. Tan & Iturralde, Cardiovasc Res 2007; 76: 409 -417.
L 1821 del/10.
SQTL 3 Incremento en la corriente iónica SCN 5 A MCD FA TV Disminución en la corriente iónica DNS SBr 1 DCC
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