Gentica Bacteriana e Clonagem Universidade de Santo Amaro
Genética Bacteriana e Clonagem Universidade de Santo Amaro Faculdade de Biomedicina Microbiologia Básica e Clínica I Siga-me no twitter: @professor_leo
DNA Ácido Desoxirribonucleico É responsável pelo armazenamento e transmissão da informação biológica
T A 5` T 3` A DNA C A G 3` G Estrutura Primária T C 5`
CROMOSSOMO n Dupla fita circular n Tamanho varia de acordo com o tipo de bactéria Ø Escherichia coli – 4, 6 milhões de bases (850 x maior que a célula) n Difuso na região nucleóide n Genes para o metabolismo e ciclo vital n Constituído por partes codificantes Ø Ausência de Introns
O cromossomo dos procariontes é circular Localização do DNA
Eucariotos x Procariotos
Meio com glicose (lac. L) gene repressor (lac. P) gene promotor (lac. O) gene operador (lac. Z) β-galactosidase • (lac. Y)lactose-permease • (lac. A) tiogalactosídeo-transacetilase
Sem glicose e com lactose
Clonagem Molecular A Bactéria como ferramenta Siga-me no twitter: @professor_leo
Estrutura básica de um plasmídeovetor
Clonagem Molecular Tecido RNA AAAA AACT GGCA TCGT RT ds c. DNA AACT ds c. DNA GGCA TCGT
VETORES ORI DNA RECOMBINANTE ORI Ampr PLASMÍDIO Ampr c. DNA
Seleção das bactérias transformadas Bactérias que não receberam o DNA (inserto) crescem formando colônias azuis (presença do gene Lac. Z) enquanto aquelas que foram transformadas crescem incolores.
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