Fldigiliszta akut toxicitsi teszt OECD 207 es szm

Földigiliszta akut toxicitási teszt OECD 207 -es számú teszt Készítette: Papp Bálint

Tesztorganizmus jellemzése Latin neve: Eisenia foetida Magyar neve: trágyagiliszta Gyűrűsférgek törzsébe tartozik Mérete 1, 5 és 30 cm között változik Szelvényszáma: 50 -250 Mivel a földigiliszta a talajjal táplálkozik, ez az élőlény alkalmas a talajban található szennyezőanyagok toxicitásának vizsgálatára Petével szaporodnak

Tesztorganizmus tenyésztése Petével szaporodnak Laboratóriumi körülmények között 50: 50 eloszlású marha vagy sertés trágya és tőzeg keverékében nevelhetők (egyéb hulladék is használható) 20°C-on Ph: 7 Kis vezetőképesség: 6 m. S alatt Ne tartalmazzon túl sok ammoniát (kevés vízelet) A tenyésztéshez fa dobozok: kb. 50 x 15 cm, jól ódó fedéllel A peték 3 -4 múlva kelnek kis és újabb 3 -4 hét múlva lesznek felhasználhatóak 300 -600 gramm tömegűek használhatók fel

Teszt jellemzése A tesztben a trágyagilisztát használjuk a talajban található szennyező anyagok toxicitásának vizsgálatára Két fajta vizsgálat: papír kontakt vizsgálat és mesterséges talaj vizsgálat Mindkettő során a végpont a letalitás ill. a túlélés Olcsó, laboratóriumi körülmények között könnyen végrehajtható Pontos Reprodukálható Akut teszt: 7 ill. 14 napig tart (a papír kontakt teszt 48 ill. 72 órán át).

Szükséges eszközök Földigiliszta tenyészet Szűrőpapír (80 -85 g/m 2; 0, 2 mm vastag; normál minőségű) Mesterséges talaj ami a következőkből áll: 10% sphagnum (felláp) tőzeg 20% kaolinos agyag (min. 30% kaolin tartalom) 70% ipari homok Nedvesség tartalom ~35% Üveg tartályok Egy 400 -800 lux fényerővel megvilágított szekrény

Papír kontakt teszt A vizsgált anyagot vízben feloldjuk (1000 mg/l koncentrációban) ha nem oldódik vízben akkor valamilyen szerves oldószerben (pl. aceton) Ebből az oldatból egy 5 tagú hígítási sort (100 -10 -4) készítünk majd mindegyik tagból 1 ml-et csepegtetünk a az előzőleg kivágott és az üvegedény aljára helyezett 8 x 3 cm-es szűrőpapírdarabra Hagyjuk megszáradni, majd száradás után 1 ml desztvizet csepegtetünk rá Mindegyik üvegbe egy gilisztát rakunk A gilisztákat előtte 3 órán át desztvizes papíron tartjuk hogy a béltartalmuk eltávozzon, megmossuk őket és úgy helyezzük be az edénybe

Papír kontakt teszt Legalább 10 ismétlést csinálunk, mindegyik hígításhoz 10 desztillált vizes kontroll minta 20°C-os sötét szekrénybe zárjuk és 48 ill. 72 óra elteltével megszámoljuk az elpusztult állatokat Minden szokatlan eseményt fel kell jegyezni

Talaj teszt 0, 01; 0, 1; 1, 0; 100; 1000 mg/kg koncentrációjú vizsgált anyag+talaj keveréket kell készíteni, ügyelni kell hogy a vizsgált anyag és a talaj jól elkeveredjen Ha szennyezett talajról van szó akkor különböző százalékos arányban kell keverni a szennyezett vagy a kontroll talajt 750 g talajt bemérünk egy üvegedénybe Belehelyezünk 10 földigilisztát (a talaj tetejére) A földigilisztákat előtte 24 óráig tiszta kontroll vagy mesterséges talajban kell tárolni, és behelyezés előtt meg kell mosni őket.

Talaj teszt Az edényeket óvni kell a kiszáradástól 4 párhuzamos mérés ajánlott 4 kontroll edény ajánlott Az edényeket állandó 20°C-os helyre rakjuk, ahol folyamatosan világítjuk őket, hogy a giliszták a talajban maradjanak A teszt időtartama 14 nap A 7 -ik és a 14 -ik napon vizsgáljuk a mortalitást Az elején és a végén is meg kell határozni a nedvesség tartalmát a talajnak Minden szokatlan eseményt fel kell jegyezni

Kiértékelés A kapott eredményeket logaritmikus-normál beosztású diagramon ábrázolni kell és ebből meg lehet határozni az LC 20 és az LC 50 értéket Fel kell jegyezni az élő giliszták számát valamint az átlagos élőtömeget a kísérlet kezdetén és végén

Kiértékelés A Jegyzőkönyvnek tartalmaznia kell Vizsgált anyag: kémiai azonosító adatok, alkalmazás módja Grafikont Nedvesség tartalom a mérés kezdetén és végén p. H a mérés kezdetén Kísérleti állatok: kor, tartási és tenyésztési körülmények, beszerzési forrás Bármilyen a kísérlet körülményeiben bekövetkező változást A kísérleti állatokon bekövetkező bármilyen fizikai, patológiai vagy magatartásbeli változást

Köszönöm a figyelmet

Források http: //titania. sourceoecd. org/vl=1786249/cl=29/nw=1/rpsv/ij/o ecdjournals/1607310 x/v 1 n 2/s 8/p 1 http: //biogreenproductshungary. com/Laboratory_Report. html http: //mek. oszk. hu/03400/03408/html/img/brehm-18 -002 -4. jpg http: //4. bp. blogspot. com/_il. OJh. C__6 Fk/Si 6 v. Wx. Mgu 0 I/AAAAA AAACy. A/YLt. Iqj. W 4 f 28/s 400/Redwiggler 2. jpg