EXTRACO DE DNA PROBLEMA Como isolar a molcula

EXTRACÇÃO DE DNA PROBLEMA: Como isolar a molécula de DNA?

EXTRACÇÃO DE DNA MATERIAL: ü Gobelés üKiwi ü Funil üVarinha mágica ü Papel de filtro ü Água ü Sal ü Etanol (96%) ü Vareta de vidro üUm copo alto üDetergente de louça üum bisturi

EXTRACÇÃO DE DNA PROCEDIMENTO: ü 1 - Preparar a solução de extracção: detergente 8%; sal de cozinha 3%. ü 2 - Descascar e cortar o kiwi em pedaços. ü 3 - Triturar o Kiwi com a solução de extracção. (3 segundos, 3 vezes) ü 4 - Filtrar utilizando um filtro de café. ü 5 - Com cuidado, adicionar etanol frio, tendo o cuidado de não misturar o etanol com o filtrado.

EXTRACÇÃO DE DNA RESULTADOS: ü Formação de duas fases distintas. ü O DNA precipita formando filamentos visíveis.

EXTRACÇÃO DE DNA EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL

EXTRACÇÃO DE DNA EXTRAÇÃO de DNA de CÉLULAS DO EPITÉLIO BUCAL PROCEDIMENTO: ü Preparar uma solução salina muito concentrada. ü Colocar uma porção dessa solução salina na boca e bochechar vigorosamente durante 2 minutos. ü Colocar o obtido num gobelé e filtrar em seguida. ü Marcar duas linhas num tubo de ensaio, uma ao meio do tubo e outra perto do bordo. ü Transferir o filtrado para um tubo de ensaio até à primeira linha. ü Adicionar, cuidadosamente, etanol até à segunda linha. ü Observar com atenção e registar.

EXTRACÇÃO DE DNA CONCEPTUALIZAÇÃO METODOLOGIA PROBLEMA TEORIA: Teoria celular – organização celular e função dos organitos Isolar ao molécula de DNA CONCEITOS: Citoplasma Aparelho de Golgi ACTIVIDADE LABORATORIAL Extracção de DNA das Retículo Endoplasmático liso células de kiwi Retículo Endoplasmático rugoso /Clélulas do epitélio bucal Mitocôndria Cloroplasto Núcleo Membrana Nuclear Lisossomas … O DNA existe quer em células animais quer em células vegetais RESULTADOS: Membrana plasmática Ribossomas CONCLUSÃO Formação de duas fases distintas. O DNA precipita formando filamentos visíveis.

EXTRACÇÃO DE DNA Tópicos para discussão 1. Quais são as estruturas celulares e qual a sua composição?

EXTRACÇÃO DE DNA üAs membranas, celular e nuclear são compostas principalmente por lípidos. As proteínas encontram-se aprisionadas na bicamada lipídica. üOs organitos celulares são compostos por proteínas, ácidos nucleicos ( DNA e RNA ), envolvidos por uma membrana.

EXTRACÇÃO DE DNA 2. Qual a função do sal?

EXTRACÇÃO DE DNA O sal proporciona um ambiente favorável para o processo de extração pois contribui com íons positivos (NA+) que neutralizam a carga negativa do DNA.

EXTRACÇÃO DE DNA 3. Porque utilizamos um liquidificador?

EXTRACÇÃO DE DNA O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula

EXTRACÇÃO DE DNA 4. Porque utilizamos um liquidificador?

EXTRACÇÃO DE DNA O liquidificador ajuda a quebrar mecanicamente as membranas da célula

EXTRACÇÃO DE DNA 5. O que acontece quando se adiciona o detergente?

EXTRACÇÃO DE DNA As enzimas presentes no detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares

EXTRACÇÃO DE DNA 6. Qual o papel do álcool?

EXTRACÇÃO DE DNA O DNA é insolúvel em álcool e deste modo se separa da solução. O DNA é menos denso que a água e os restantes elementos celulares, por isso surge à superfície da solução

EXTRACÇÃO DE DNA 7. Por que não podemos observar a dupla hélice?

EXTRACÇÃO DE DNA A estrutura de dupla hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. O obsrvamos são milhares de moléculas de DNA.

EXTRACÇÃO DE DNA 8. Onde se encontra o DNA?

EXTRACÇÃO DE DNA Cerca de 99% do DNA encontra-se no núcleo da célula. O restante DNA encontra-se em locais específicos, como por exemplo organitos ( as mitocôndria e os cloroplastos possuem o seu próprio DNA ). Apesar desses organitos terem o seu próprio cromossoma eles não podem contar com a sua informação. As mitocôndrias e cloroplastos necessitam de genes especiais situados noutros organitos. Para a maioria das funções, estes organitos utilizam os cromossomas nucleares.