ESTUDIO PRECLINICO Y CLINICO FASE I y Fase

ESTUDIO PRECLINICO Y CLINICO FASE I y Fase II de Dioscorea bulbifera (Ñatipapa) en pacientes con esquizofrenia. Dr. Roberto Inchaustegui G 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Introducción n Este trabajo se sustenta en la teoría científica de interacción y potenciación de la suma de los constituyentes químicos que hoy se conoce como fitocomplejo, que al sumarse al sistema de microdosis, (predisposición fisiológica del hombre que al recibir dosis de 1000 a 15000 veces menores a las empleadas en la medicina alopática), consigue efectos beneficiosos empleando extractos vegetales como fitomedicamento y en microdosis, evitan los riesgos de toxicidad, reacciones adversas y efectos secundarios debido a la mínima concentración del fitocomplejo que actúa en fisiología y fisiopatología molecular. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Esquizofrenia n n 34% La esquizofrenia es una enfermedad mental que afecta el tono afectivo, la conducta y la manera en que los pacientes se comunican con otras personas, presenta sintomas negativos y positivos. involucra una combinación de factores genéticos y epigenéticos que producen en la corteza prefrontal alterada, receptores acoplados a la proteína G disfuncionales, por trastornos en su conformación, éstos modulan irregularmente la formación y liberación de la señal presináptica y la transducción postsináptica mediada por los receptores. Este es un punto clave que podría estar fallando en el caso de la esquizofrenia. hhhhhhhh 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Proteína G trastorno Gα Proteína G trastorno βγ Gγ Mitocondria P trastorno P P 11/4/2020 P Dr. Roberto Inchaustegui G

Estudio preclínico n n n Etnobotanico Botánico Farmacognóstico Farmacológico Toxicológico 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Estudio etnobotánico n n Según la información recabada de curanderos y herbolarios, el tubérculo aéreo de la Ñatipapa presenta propiedades para el tratamiento de las enfermedades dérmicas y gástricas, fiebre, tumoraciones, úlcera gástrica y antilitiásico renal. Según referencias bibliográficas Dioscorea bulbifera L. es alimenticia, diurético, antídoto, hemostático, anticancerígeno, antidisentérico, antisifilítico, antitumoral y contra los forúnculos. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Caracterización botánica n n n n n Identificación Taxonómica : Clasificación Adolph Engler (1954 -1964)³° DIVISION : Angiospermae CLASE : Monocotyledoneae ORDEN : Liliflorae FAMILIA : DIOSCOREACEAE GENERO : Dioscorea ESPECIE : Dioscorea bulbifera L. Sistema : Clasificación Arthur Cronquist (1988)¹º DIVISION : Magnoliophyta CLASE : Liliopsida SUB-CLASE : Liliidae ORDEN : Liliales FAMILIA : DIOSCOREACEAE GENERO : Dioscorea ESPECIE : Dioscorea bulbifera L. Nombre vulgar : Ñatipapa Sistema 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Estudio farmacognóstico ENSAYOS RESULTADOS (*) Extracto acuoso METABOLITOS Molish ++ Glicósidos Benedict ++ Glicósidos Fehling +++ Azúcares Reductores Antrona ++ Glicósidos Bomtrager + Quinonas Afrometrico +++ Saponinas tricloruro de fierro + Fenoles y Taninos Ninhidrina - Aminas y Aminoácidos Shinoda ++ Flavonoides (*) (+++) Abundante; (++) moderado; (+) leve; (0) ausente; (-) no se realizó 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Estudio farmacológico n Actividad Analgésica n n Evaluación de la actividad y performance motora (SNC) n n n Método de contorsiones abdominales. “Chimney test” Evaluación de la actividad sobre el tránsito intestinal (SNC) n Contraste : carbón activado Evaluación de la actividad inmunoestimulante. n Método de Delaveau 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Resultados farmacológicos Método de las contorsiones abdominales No se observa efecto 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Resultados farmacológicos Aumento de la destreza y la actividad motora 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Resultados farmacológicos Disminuye el peristaltismo 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

ACTIVIDAD INMUNOESTIMULANTE Presenta actividad inmunoestimulante 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Estudio toxicológico n n Toxicidad aguda según el método de DL 50– vía intraperitoneal Toxicidad a dosis repetidas – vía oral Evaluación genotóxica en células germinales de espermatozoides de ratones. Ensayo de inducción de micronúcleos en médula ósea de ratón 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Resultados de la DL 50 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Resultados de la DL 50 El extracto acuoso es levemente tóxico. X DL 50 : 1400 mg/Kg. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Toxicidad crónica a dosis repetidas El extracto no es tóxico. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Evaluación de la genotoxicidad en cabezas de espermatozoides El extracto no es genotóxico. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Micronúcleos e índice de genotoxicidad El extracto no es genotóxico. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Estudio clínico n n Ensayo clínico fase II 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Ensayo clínico fase I n n n Diseño experimental Estudio prospectivo, al azar simple, ciego, controlado y unicéntrico. Muestra de estudio: 50 voluntarios sanos masculinos 5 grupos: I-V 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Grupos de estudio Grupos Dosis Concentración Tiempo I 03 dosis unitarias de 0. 1 ml de una solución acuosa 0. 25 mg / ml Cada 4 días por 30 días 03 dosis unitarias de 0, 1 ml en solucion salina Cada 4 días por 30 días 03 dosis unitarias de 0, 025 mg Cada 4 días por 30 días 03 dosis unitarias 0. 1 ml de agua bidestilada par inyectable Cada 4 días por 30 días 10 voluntarios III 10 voluntarios IV 10 voluntarios 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

RESULTADOS Comparación inicial y final del hemograma por grupos VARIA B L E S P (P > 0. 05) = NS PROMEDIOS BASALES GI GI GI I I FINALES GI GII GIII GIV V VAL O R NOR M A L onocitos 0. 2 9 4 0. 0 4 5 0. 6 8 0 0. 4 1 0 1. 70 2. 30 1. 30 2. 20 2. 60 0. 80 1. 50 1. 70 4 - 8% Eosinófi lo s 0. 8 1 2 0. 0 2 5 0. 0 6 2 0. 3 2 9 4. 9 5. 60 8. 70 5. 30 2. 80 4. 60 6. 80 1– Segmen ta d o 0. 5 4 2 0. 0 7 8 0. 2 2 9 0. 3 6 2 54. 7 0 52. 9 0 55. 0 0 56. 2 0 57. 1 0 60. 0 0 59. 4 0 50 – Linfocit os 0. 3 6 2 0. 5 1 8 0. 8 9 0 0. 8 1 9 38. 6 0 38. 8 0 34. 9 0 32. 8 0 34. 7 0 36. 3 0 34. 9 0 31. 9 0 25 – Leucoci to s 0. 7 0 0 0. 9 8 4 0. 7 5 3 0. 1 6 9 9770 1046 0 1120 0 1116 0 9360 1044 0 1095 0 9740 60001 0 0 Hemato 0. 7 46. 5 43. 5 45. 1 43. 0 46. 1 4 % 11/4/2020 0. 4 6 0 % 3 0 % Dr. Roberto Inchaustegui G 43. 8 44. 2 43. 9 37 –

RESULTADOS Comparación inicial y final del perfil bioquímico por grupos VARIABL E P P > 0. 05 (N. S. ) PROMEDIOS BASALES VALOR NORMAL FINALES GI GIII GIV GI GII GIII G IV Glucosa 0. 5057 0. 9746 0. 7137 0. 1678 74. 70 99. 00 75. 50 81. 10 77. 80 100. 1 76. 90 75. 20 60 – 110 mg/dl Colesterol 0. 5778 0. 7234 0. 8778 0. 5901 169. 3 184. 8 159. 8 160. 2 159. 8 179. 7 157. 2 151. 9 < 200 mg /dl Amilasa 0. 7069 0. 8691 0. 6292 0. 7276 65. 80 71. 50 66. 40 74. 70 62. 70 69. 70 62. 30 70. 30 28 – 100 U/L TGO 0. 4121 1. 000 0. 5165 0. 1785 26. 70 29. 10 30. 80 28. 20 29. 50 29. 10 33. 80 31. 90 Hasta 37 U/L TGP 0. 5027 0. 8846 0. 9755 0. 7716 33. 40 31. 90 38. 30 32. 80 38. 30 31. 30 38. 10 31. 30 Hasta 40 U/L Triglicérid o 0. 5056 0. 5234 175. 8 160. 8 125. 4 120. 3 151. 8 130. 8 127. 9 121. 6 < 200 mg/dl Calcio 4. 1 x 10 - 1. 2 x 10 - 0. 3657 0. 0134 8. 91 9. 0 9. 5 10. 2 9. 78 9. 6 9. 7 8. 4– 10. 2 mg/dl Urea 0. 2080 0. 8777 0. 747 0. 4686 21. 01 21. 17 18. 43 19. 48 18. 92 21. 47 22. 42 20. 99 10 -50 mg/dl Creatinina 0. 7246 0. 3813 0. 9641 0. 7768 0. 928 0. 962 0. 923 0. 932 0. 907 0. 910 0. 920 0. 919 0. 8 -1. 4 mg/dl 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Ensayo clínico fase II n n n Diseño experimental Estudio, prospectivo, al azar simple, ciego, controlado y unicéntrico. Muestra de estudio: Cincuenta pacientes internos del Centro de Rehabilitación Mental de Iquitos ( CREMI ) Criterios de selección Para la selección de la población de estudio se han tomado en cuenta los criterios básicos recomendados por la OMS: criterio de inclusión, ético y moral, y de exclusión. Criterios de inclusión Todos los pacientes del estudio permanecieron internados y fueron diagnosticados con enfermedades mentales, los pacientes fueron de ambos sexos cuyas edades fluctuaron entre 25 y 50 años. Criterio ético Se obtuvieron los consentimientos de participación en el estudio por escrito por parte del paciente o de sus familiares. Criterio de exclusión Incumplimiento del protocolo de aplicación y presencia de efectos adversos atribuibles a la medicación durante el periodo de estudio. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Grupos de estudio GRUPO DOSIS Tiempo I (15 pacientes) 0. 01 m. L Cada 4 días por 30 días 0. 005 m. L Cada 4 días por 30 días 0. 1 m. L Cada 4 días por 30 días extracto acuoso (Dioscorea bulbifera L), II(16 pacientes) extracto acuoso (Dioscorea bulbifera L), III (19 pacientes) Haloperidol 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

RESULTADOS Comparación inicial y final del hemograma por grupos VARIABLE S P (P > 0. 05) = NS GI GII Monocitos 0. 158 2 0. 250 3 Eosinófilos 0. 541 7 Segmentado GIII PROMEDIOS BASALES VALOR NORM AL FINALES GI GII GIII 0. 197 2 1. 917 1. 500 0. 750 0. 933 0. 750 0. 083 4 - 8% 0. 366 2 0. 748 4 9. 250 12. 00 12. 16 11. 33 9. 41 10. 83 1 – 4% 0. 285 7 0. 962 6 0. 121 7 65. 91 59. 91 67. 75 60. 08 60. 41 50 – 60 % Linfocitos 0. 059 0 0. 261 4 0. 027 4 22. 91 26. 66 19. 41 27. 08 29. 83 27. 08 25 – 30 % Leucocitos 0. 180 9 0. 003 8 0. 087 8 7208 7358 8233 7941 10233 9683 60001000 0 Hematocrito 0. 432 0. 181 6 9 11/4/2020 0. 704 3 43. 41 47. 14 44. 33 45. 16 49. 71 45. 41 37 – 47 % Dr. Roberto Inchaustegui G

RESULTADOS Comparación inicial y final de los valores de electrolitos por grupos VARIA BL ES ( P > 0. 005 ) = NS PROMEDIOS BASALES GI GII GIII Sodio 0. 60 4 2 0. 01 0 1 0. 48 142. 66 147. 8 2 3 3 135. 6 6 140. 131. 135 – 9 2 0 145 7 5 0 mmol/L Potasio 0. 14 2 5 0. 74 7 6 0. 84 3. 79 2 5 3. 76 3. 99 Cloruro 0. 66 8 7 0. 63 5 1 0. 91 102. 75 103. 7 6 5 2 105. 0 8 103. 104. 94 – 112 5 2 9 mmol/L 8 5 1 11/4/2020 GI FINALES 3. 90 GI GII 3. 86 Dr. Roberto Inchaustegui G GIII VALOR ES NORM AL ES 3. 73 3. 5 – 5 mmol/L

RESULTADOS Comparación inicial y final de los valores de hormonas por grupos VARI A BLES P (P > 0. 05) = NS PROMEDIOS VALORES NORMALES BASALES FINALES GI GIII GI GIII TSH 0. 529 2 0. 858 6 0. 769 8 2. 04 1. 77 2. 10 2. 47 1. 70 1. 98 T 3 0. 091 3 0. 140 0 0. 187 4 3. 59 3. 61 4. 05 4. 39 4. 23 4. 73 1. 1 -2. 9 nmol/L T 4 0. 515 0 0. 670 8 0. 605 7 1. 08 1. 11 1. 18 1. 16 1. 14 1. 23 5 – 12 ug / dl Estradi ol 0. 950 9 0. 583 3 0. 551 6 63. 13 23. 40 29. 74 61. 44 21. 32 37. 48 <180 pmol/L ♂ FSH 0. 357 4 0. 969 6 0. 882 6 5. 04 18. 18 6. 51 6. 10 17. 81 6. 23 0. 9 -15 UI / L ♂ 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G 0. 4 – 5 m. U/L

Aplicación del PANSS y evaluación por grupos de tratamiento GRUPOS DE ESTUDIO RESULTADOS DE LA APLICACIÓN DEL PANSS EXPERIMENTARON MEJORIA SUBESCAL A (+)Y( -) SUBESCAL A (+) SUBESCAL A (-) SUB ESCALA(+) Y SUBESCALA PSICOLOG. NO EXPERIMENTARON MEJORIA N % N % N % GRUPO I 4 57. 14 - - 1 14. 24 2 28. 57 7 50. 0 GRUPO II 7 58. 33 - - 4 33. 33 1 8. 33 3 20. 0 GRUPO III 3 37. 5 2 25. 0 - - 3 37. 5 11 57. 9 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Discusión 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Aspectos éticos en el estudio. n n El estudio clínico ha respetado los principios de la Declaración de Helsinski revisada: en 1975 (Tokio), 1983 (Venecia) y 1989 (Hong Kong). El estudio clínico se ha desarrollado de acuerdo a los principios básicos: respeto a las personas, beneficencia y justicia. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Problema de salud ESQUIZOFRENIA 34% PROTEINA G atrapada por anticuerpos. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Proteína G o lej p m co trastorno Gα ito f n ció Ac Proteína G trastorno βγ jo ple m co Gγ Mitocondria P trastorno P P 11/4/2020 P Dr. Roberto Inchaustegui G c Ac fito n ió

Conclusiones n n El estudio farmacognóstico demostró que la droga es el tubérculo aéreo y en el extracto acuoso se comprobó la presencia de azúcares reductores, saponinas, flavonoides, fenólicos simples y taninos. El estudio Farmacológico reportó actividad inmunoestimulante disminución del recorrido a través del tránsito intestinal, estimulación de la actividad y performance motora y ausencia de efecto analgésico. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Conclusiones n n n En el ensayo toxicológico, la toxicidad aguda del extracto acuoso demostró en la DL 50 leve toxicidad. No es tóxica a dosis repetidas (toxicidad crónica) y no presentó genotoxicidad sobre las células germinales y médula ósea de ratón. En el ensayo clínico Fase I se ha demostrado su tolerancia al no poseer perfil de reacciones adversas y se ha establecido su seguridad. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

CONCLUSIONES n En el ensayo clínico Fase II se ha obtenido información preliminar de su eficacia en la dosis-respuesta en los 50 pacientes esquizofrénicos, al aplicarles IM a dosis 0. 01 y 0. 005 m. L donde el 80% de los pacientes del Grupo II, el 50% del Grupo I y el 42. 1% del Grupo III (control positivo) experimentaron mejoría clínica en síntomas cognoscitivos, y síntomas positivos y negativos de enfermedad mental. 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G

Gracias por su atención! Contacto: rinchaust@terra. com. pe www. robertoinchaustegui. org 11/4/2020 Dr. Roberto Inchaustegui G