ESTUDIO MOLECULAR EN PROCESOS DE RIESGO TROMBOTICO Consorcio
ESTUDIO MOLECULAR EN PROCESOS DE RIESGO TROMBOTICO Consorcio Hospital General Universitario de Valencia Amparo Benlloch Salcedo Mercedes Egea Rico Rosa Collado Nieto David Ivars Santacreu Maria Ortuño Peñalver Juana Serrallé Rodríguez Francisca Romero Lucas
INTRODUCCIÓN □ La trombofilia es una predisposición para padecer trombosis. □ En cerca del 40 % de los casos hay una causa hereditaria que por sí sola puede no desembocar en un cuadro tromboembólico. □ Sin embargo, cuando hay otros factores de riesgo combinados, como una inmovilización prolongada, una intervención quirúrgica, un embarazo, el uso de anticonceptivos orales o una terapia hormonal sustitutiva, existe un efecto aditivo que puede desencadenar un proceso trombótico o tromboembólico. □ La trombofilia se ha asociado a abortos de repetición, por trombosis de la microvasculatura uteroplacentaria e hipoperfusión, a infertilidad y a diversas complicaciones obstétricas como preclampsia, desprendimiento prematuro de placenta o escaso desarrollo intrauterino del feto.
INTRODUCCIÓN □ La mutación del Factor II (FII) o Protrombina (20210 G>A) se asocia a un incremento de los niveles plasmáticos de Protrombina. □ Por su parte, la mutación del Factor V (FV) Leiden (1691 G>A) la hace resistente a la acción inhibidora de la Proteína C Activada. □ Las mutaciones FII (20210 G>A) y FV Leiden están presentes en el 2% y 5% respectivamente de la población general.
INTRODUCCIÓN Gen FV Gen FII
OBJETIVOS (I) □ Analizar incidencia de las mutaciones del FII y FVL en diferentes grupos de riesgo Procesos trombóticos Estudios Familiares Procesos ginecológicos Tratamiento anticonceptivo SMP
OBJETIVOS (II) □ Comparación entre dos sistemas de análisis en nuestra unidad Tiras reactivas Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
MATERIAL Y METODO □ Periodo comprendido entre: Marzo 2007 Mayo 2013
MATERIAL Y METODO □ Hasta Diciembre de 2011 Tiras reactivas
Tiras reactivas □ A partir de sangre periférica
Tiras reactivas □ Obtención del ADN
Tiras reactivas □ Amplificación del gen (PCR)
Tiras reactivas □ Hibridación mediante tiras de Nitrocelulosa
Tiras reactivas □ Detección de las mutaciones en las tiras Tira del paciente Decoder
MATERIAL Y METODO □ Desde 2011 a 2013 Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V □ Sistema automatizado que integra: □ Purificación de la muestra. □ Ampliación de los ácidos nucleicos □ Detección de la secuencia objetivo en sangre total, utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real.
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V
MATERIAL Y METODO □ Población estudiada: 740 pacientes
MATERIAL Y METODO □ Durante el año 2010, se realizaron determinaciones en paralelo. CONFIRMATORIO
MATERIAL Y METODO Estudios familiares Procesos ginecológicos Tratamientos anticonceptivos 442 110 70 4 Síndromes mieloproliferativos 114 Procesos trombóticos
RESULTADOS □ Gen del factor II
RESULTADOS □ Gen del factor V Leiden
RESULTADOS □ Alteración en ambos genes Casos: 3 0, 41%
RESULTADOS □ Mutacion del Gen del factor II, según grupos de riesgo
RESULTADOS □ Mutacion del Gen del factor V Leiden, según grupos de riesgo
RESULTADOS □ Repeticiones Tiras reactivas Xpert Hemos. IL Factor II & Factor V 11 1 Fallo en la tira Fallo en el instrumento
CONCLUSIONES □ La incidencia de mutaciones del FII (11, 49%) y del FVL (10, 41%) durante el periodo estudiado en nuestro centro es similar al publicado en la literatura. □ En el grupo de tratamiento con anticoncepción no se encontraron mutaciones en ninguno de los dos genes, lo cual cuestiona la utilidad del análisis en este grupo.
CONCLUSIONES □ El sistema automatizado es la técnica de elección para el estudio de mutaciones relacionadas con la trombofilia ya que presenta una serie de ventajas frente al sistema de detección por tiras de nitrocelulosa, entre las que destaca:
CONCLUSIONES □ □ □ Mayor sensibilidad Mayor trazabilidad de la técnica Menor manipulación técnica. Menor riesgo de contaminación Rapidez
Gracias
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