ESTRUCTURA PROPIEDADES Y FUNCIN DE CIDOS NUCLICOS TRANSFERENCIA

ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLÉICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO: CONJUGACIÓN

Transmisión de Material Genético Transmisión Vertical Progenitor al hijo Horizontal Transformaci ón Transducción CONJUGACIÓ N

Transformación • Una célula bacteriana toma DNA del ambiente y lo incorpora. • De manera natural en Gram +.

Transducción • Involucra presencia de fagos, los cuáles transfieren el DNA de la célula donadora a la célula receptora, la cual puede incorporarlo a su cromosoma. • Ciclo Lítico.

Conjugación • Una célula bacteriana transfiere DNA a otra célula bacteriana, por contacto directo célula a célula. • DNA transferido: Parte del genoma ó un plásmido.

Descubrimie nto de la Conjugación ¿Las bacterias tienen procesos similares a la reproducción sexual y la recombinación? Joshua Lederberg y Edward Tatum (1946) descubren un proceso similar…

Descubrimie nto de la Conjugación “Las bacterias absorbían lo que secretaban las otras, y podían crecer…” Bernard Davis: Contacto celular es necesario.

Plásmidos Gram - Escherichia Pseudomonas Gram + Enterococcus Streptococcus Bacillus Staphylococcus Streptomyces Plásmidos autotransmisibles Sistemas de transferencia: codificados por los genes tra del plásmido

Plásmidos

Conjugación: Gram • E. coli. • Plásmido F: factor de fertilidad, impone la capacidad de donar material genético: Célula donadora (F+), Célula receptora (F-). Genes tra Dtr Preparación del plásmido • Mpf Sistema que mantiene unidas a las células donadora y receptora durante el apareamiento Pili • Largo y flexible: transferencia en medio liquido Corto y rígido: transferencia en medio sólido

Conjugación: Gram -

Conjugación: Gram • F+ y F-: Ambas células se vuelven F+ CONJUGACIÓ N

Conjugación: Gram • F+ y F+: Se inhiben por contacto CONJUGACIÓ N

Conjugación: Gram • Hfr (alta frecuencia de recombinación): el plásmido se integra al cromosoma bacteriano. Sigue siendo donadora.

Conjugación: Gram • Hfr y F-: no se transfiere el cromosoma completo, la parte del plásmido F se escinde.

Conjugación: Gram • F’: Se escinde el plásmido F y se lleva consigo una parte del cromosoma. plásmido F’, donador.

Conjugación: Gram • F’ y F-: Se generan células diploides parciales , la receptora se llama merocigoto y sigue siendo F-. CONJUGACIÓ N

Conjugación Gram + • Similar a lo que ocurre con Gram -. • Sistema Mpf, es más simple. • E. faecalis secretan péptidos parecidos a feromonas que estimulan la expresión de genes tra en las bacterias vecinas.

Conjugación • • ¿Para qué? Resistencia: antibióticos, metales pesados Colicinas y Bacteriocinas: proteínas con actividad antimicriobiana. Factores de virulencia: Toxinas. Actividades metabólicas: Síntesis ó degradación de compuestos carbonados ¿Cómo seleccionamos? • Genes marcadores, dentro del plásmido y permite seleccionar colonias conjugantes por fenotipos: auxotrofías, fuente de energía, resistencia/susceptibilid ad a antibióticos

En la práctica… E. coli JM 1452 Str. R Resistente a Estreptomicina. No codifica para el pili RECEPTOR (genes tra), por lo tanto es. . . A E. coli W 3110/F´Km. Tn 3 DONADOR Resistente a la Kanamicina. Cepa F’, por lo tanto es… A

En la práctica… 300 µL Resistente a Estreptomicina 600 µL 120 µL Resistente a Kanamicina

En la práctica…

Eficiencia de conjugación #CT: Número de Colonias Transconjugantes #CP: Número de Colonias Parchadas