ESTRUCTURA PROPIEDADES Y FUNCIN DE CIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA

ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN

Composición de los ácidos nucleícos Purinas Adenina Guanina Pirimidinas Citosina Uracilo Timina

Polímeros lineales de nucleótidos. Nucleótidos cuyos grupo fosfato unen las posiciones 3’ y 5’ de residuos de azúcar consecutivos. Los fosfatos de estos polinucleótidos tienen carga negativa a p. H fisiológico

DNA 22 to 26 Å ancho

Plásmidos • Fragmentos de ADN extracromosómicos. Los plásmidos o vectores se replican y transcriben de manera independiente del AND cromosómico.

Algunas características de los plásmidos: • Confieren resistencia a antibióticos. • Confieren resistencia a metales. p. BR 322

Mecanismos de transferencia horizontal de material genético: • Transformación • Transducción • Conjugación

Cambio heredable de una célula u organismo conseguido por DNA exógeno. Sólo algunas bacterias pueden ser transformadas, éstas reciben el nombre de competentes.

• El virus bacteriófago se comporta como un vector intermediario entre dos bacterias.

Fusión temporal de dos organismos unicelulares para el intercambio sexual de material genético

Factor F • Elemento en plásmido que le confiere la capacidad de ser transferido de una bacteria que lo posee a una bacteria que carece de este factor por conjugación. Este factor es portado en el episoma* F • * Episoma: elemento genético en bacteria que se puede replicar libre en el citoplasma o puede ser insertado y replicado en el cromosoma bacteriano. Un ejemplo de episoma es el plásmido

Tipos de plásmido de acuerdo al factor F • Plásmidos conjugativos contienen “tra-genes”, los cuales ejecutan complejos procesos de conjugación, como la transferencia de plásmidos a otra bacteria. • Plásmidos “movilizables” sólo pueden transferirse en presencia de un plásmido conjugativo.

Plasmido F

- Bacterias F+ : si el factor F se encuentra libre en el citoplasma. - Bacterias Hfr : si el factor F se encuentra integrado en el cromosoma bacteriano. -Bacterias F-: carecen del factor F (células receptoras)

CONJUGACIÓN BACTERIANA

Apareamiento entre las bacterias: F+ y F-

Células Hfr (high frequency recombination) Apareamiento entre las bacterias: Hfr y F-

Procedimiento experimental E. coli JM 1452 Str. R (Receptora) + E. coli W 3110/F´Km. Tn 3 en LB (Donadora) Tubo con 1 m. L LB, 0. 5 m. L de JM y 0. 2 m. L de W 3 Incubación a 37°C por 1 hora sin agitación. Caja petri LB con 2% estreptomicina Sembrado por estría E. coli JM 1452 Str E. coli W 3110/F´Km. Tn 3 Mezcla Incubación por 24 horas a 37 °C, refrigerar a 4 °C Parchar 50 colonias aisladas en LB con 1) Estreptomicina y 2) Kanamicina Incubar 24 h a 37 °C Observar y analizar resultados Reportar % de colonias transconjugantes

Sembrado por estría

Actividades para la siguiente semana