Espectrofotometra 4F Qu es espectrofotometra Se basa en

Espectrofotometría 4°F

¿Qué es espectrofotometría? • Se basa en la relación entre la absorción de la luz por parte de un compuesto y su concentración. • Cuando luz monocromática (de una sola longitud de onda) incide sobre un medio homogéneo, una parte de la luz incidente es absorbida por el medio y otra transmitida. • Dependiendo del compuesto y el tipo de absorción a medir, la muestra puede ser líquida, sólida o gaseosa. La muestra generalmente es disuelta para formar una solución. • El espectro de absorción de cada sustancia se representa con una curva que muestra la cantidad de energía radiante absorbida (absorbancia) en cada longitud de onda del espectro electromagnético.

Espectrofotómetro UV visible • Su funcionamiento se basa en la luz de la lámpara especial que posee, que es guiada por medio de un conector que selecciona y separa la luz de la longitud de onda, para luego pasar por una muestra. • La intensidad de la luz que sale de esa muestra es captada y se compara con la intensidad de la luz que incidió en esa muestra, con esa información se puede calcular la transmitancia y absorbancia, las cuales dependerán de la concentración de la sustancia.

Espectrofotómetro UV visible Las celdas ópticas o cubetas contienen la muestra ya preparada como solución, luego son introducidas en el espectrofotómetro para comenzar el análisis.

Ley de Beer-Lambert

Ley de Beer-Lambert

Ley de Beer-Lambert: Absorbancia

Ley de Beer-Lambert: Transmitancia

Ley de Beer-Lambert: Transmitancia Gráfico absorbancia y transmitancia

Ley de Beer-Lambert: Aplicaciones • Si una especie química presenta color, se puede analizar mediante técnicas colorimétricas y determinar la concentración de los analitos en función de las absorbancias obtenidas en un espectrofotómetro. • Permite construir las curvas de calibración, con las cuales se puede determinar la concentración de una sustancia, tomando en cuenta el efecto matriz de la muestra. • Se usa bastante para analizar proteínas, debido a que varios aminoácidos presentan absorciones importantes en la región ultravioleta del espectro electromagnético. • Las reacciones químicas o fenómenos moleculares que impliquen un cambio en la coloración pueden analizarse mediante absorbancia a una o más longitudes de onda.

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