ENZIMEK KRLETTANI S LABORATRIUMI JELENTSGE Szab Antal SE

ENZIMEK KÓRÉLETTANI ÉS LABORATÓRIUMI JELENTŐSÉGE Szabó Antal SE ÁOK I. Gyermekgyógyászati Klinika Laboratóriuma

ZYME KOVÁSZ, ÉLESZTŐ, FERMENTUM

ENZIMEK SPECIFIKUS BIOKATALIZÁTOROK E + S >> ES > EP >> 1. Oxidoreduktázok (ADH) 2. Transzferázok 3. Hidrolázok 4. Liázok 5. Izomerázok 6. Ligázok E + P

ENZIMANALITIKA 1. ENZIM MINT AZ ANALIZIS TÁRGYA ACE, Ac. P, ALP, α-Amiláz, Ch. E, CK, GOT, GPT, γ-GT, NSE, LDH, PI, a. PTI, AT-III, α 1 -AT Enzimhiány, kóros enzimek detektálása 2. ENZIM MINT AZ ANALIZIS ESZKÖZE Enzimatikus mérőmódszerek (Glu, Urea, Chol, TG, Laktát, Húgysav, Epesavak, Hormonok mérése) Enzimelektródok (Bedside testing, inz. pumpa szenz) Enzimimmunanalitika (EIA: EMIT, ELISA) Molekuláris biológiai vizsgálatok (PCR)

MEGBÍZHATÓ INFORMÁCIÓ SZOLGÁLTATÁS DÖNTÉSEKHEZ

AZ ENZIMDIAGNOSZTIKA TÖRTÉNETE 1908 1930 1955 1960 1970 1987 Wohlgemuth Bodansky Wroblewsky Wilkinson Szász Gábor Kornberg Mullis Diasztáz = α-Amiláz Alkalikus foszfatáz GOT és GPT CK és mechanizmus γ-GT, LAP és CKMB DNA/Taq polimeráz PCR technika

ENZIMDIAGNOSZTIKA 1. Laktát-dehidrogenáz (LDH) α-Hidroxi-butirát-dehidrogenáz (α-HBDH) Glükóz-6 -foszfát-dehidrogenáz (G 6 P-DH) Glutamát-dehidrogenáz (GLDH)

ENZIMDIAGNOSZTIKA 2. γ-Glutamil-transzferáz (γ-GT) Glutamát-oxálacetát-transzamináz (GOT) Aszpartát-aminotranszferáz (ASAT) Glutamát-piruvát-transzamináz (GPT) Alanin-aminotranszferáz (ALAT) Kreatin-kináz (CK, CPK) Galaktóz-1 -foszfát uridil-transzferáz

ENZIMDIAGNOSZTIKA 3. α-Amiláz és Lipáz Kolinészteráz (Ch. E és Ψ-Ch. E) Alkalikus foszfatáz (AP, ALP) Acid foszfatáz (Ac. P) Glükóz-6 -foszfatáz Angiotensin I. konvertáló enzim (ACE) Tripszin, Kimotripszin, α 1 -Antitripszin Neuron specifikus enoláz (NSE)

ENZIMDIAGNOSZTIKA 4. Enzimek a véralvadási vizsgálatoknál Protrombin idő (PI, INR) Aktivált parciális tromboplasztin idő (a. PTI) Trombin idő AT-III. Heparin szint Plazmin, α 2 -antiplazmin, urokináz Egyedi alvadási faktorok, inhibitorok mérése

ENZIMEK LOKALIZÁCIÓJA Citoplazmatikus enzimek Mitokondriális enzimek Lysosomális enzimek Membrán lokalizált enzimek Sejtmagban funkcionáló enzimek

ENZIMEK SZERVENKÉNT Máj specifikus enzimek: GPT, γ-GT, Ψ-Ch. E Izom specifikus enzimek: CK, CKMM, CKMB Pankreász specifikus enzimek: Amiláz, (Lipáz) Vese specifikus enzimek: vizelet ALP, γ-GT Tüdő specifikus enzimek: (ACE), PHI Multiorganikus enzimek: LDH, GOT, ALP

ENZIMDIAGNOSZTIKA Elsődleges enzimzavar (CO, CN-, SH 2 mérgezések, toxinok, és vitaminhiány). Celluláris enzimopathiák (enzimszintézis hibái, regulációs zavarok, tumorok). Sejt, szövet, szerv károsodások megítélése. Enzim elimináció gátolt (epeút elzáródásnál ALP, prosztatánál Ac. P, pankreásznál Amiláz)

ENZIMEK MINT ANALITIKAI REAGENSEK 1. Glükóz + O 2 + GOD = Glükonsav + H 2 O 2 + POD + Klórfenol = Színes termék Karbamid + Ureáz = 2 NH 3 + CO 2 Húgysav + Urikáz = Allantoin Laktát + NAD+ + LOX = PIRUVÁT + NADH

ENZIMEK MINT ANALITIKAI REAGENSEK 2. ENZIMIMMUNANALITIKA (EMIT, ELISA) Ag + Ab + Ag~E = Ag–Ab + Ag-Ab~E [Ag] = [Ag-Ab] [Ag-Ab~E] K [Ab] [Ag~E] kötött frakció szabad frakció Totál és a kötött/szabad frakció mérése

ENZIMEK MINT ANALITIKAI REAGENSEK 3. ENZIMELEKTRÓDOK (PÁCIENSKÖZELI LABORATÓRIUMI VIZSGÁLATOKNÁL, POCT) IONSZELEKTÍV/MOLEKULASZELEKTÍV ELEKTRÓD + ENZIMMEMBRÁN (INZULINPUMPA SZENZORA)

ENZIMEK MINT ANALITIKAI REAGENSEK 4. MULEKULÁRIS DIAGNOSZTIKAI VIZSGÁLATOK, POLIMERÁZ LÁNCREAKCIÓ PCR TECHNIKÁK Restrikciós endonukleázok DNS ligázok DNS/RNS polimerázok TAq polimerázok

ÖSSZEFOGLALÁS 1. 2. 3. szemeszterben orvosi kémia, biokémia mint elméleti modul 5. 6. szemeszterben kórélettan és klinikai laboratóriumi diagnosztika, mint preklinikai modul 7 -12. szemeszterben a klinikai modulokban a tanultak hasznosítása, nevezetesen:

ENZIMEK KÓRÉLATTANI ÉS LABORATÓRIUMI JELENTŐSÉGE

CÉLKITŰZÉSEIM VÁZLATA Graduális oktatás (klinikai labor gyakorlatok) Postgraduális oktatás (rez. + klin. biokémikus) Kötelező továbbképző tanfolyamok SE Központi Laboratórium(ok) koordinálása Tudományos munka (TDK, Ph. D hallgatók).