ELEKTRKSEL TEMELDE SABT FREKANSLI VE DEKEN FREKANSLI ELEKTRK
ELEKTRİKSEL TEMELDE, SABİT FREKANSLI VE DEĞİŞKEN FREKANSLI ELEKTRİK ALANIN, İNSAN ERİTROSİT HÜCRELERİNE UYGULANMASININ GLUKOZU YÜKSEK VE DÜŞÜK ORTAMDAKİ CANLILIK ÖZELLİKLERİNİN DEĞERLENDİRİLİP, POTANSİYEL TEDAVİ MODALİTELERİNDEKİ POTANSİYEL ETKİNLİĞİNİN ÖNGÖRÜLMESİ OZCAN K 1, SIMDI E 2 1 İstanbul Üniversitesi Elektrik- Elektronik Mühendisliği 2 Uludağ Universitesi Tıp Fakültesi GİRİŞ Bu çalışmanın içeriği genel olarak en düşük frekanslı elektrik alandan –fakat en çok üzerinde durduğumuz ve dikkat çektiğimiz konu çok düşük frekanslı (Extremely Low Frequency)orta ve yüksek frekanslara kadar elektriksel alanın ve manyetik alanın (ELF, MF, HF, EMF ) birçok hücre, doku, organlara etkileri hakkında kapsamlı bir literatür taraması ve fikirlerimiz doğrultusunda yapacağımız sabit elektrik alan ve değişken frekanslı elektrik alanın hücre üzerindeki etkileriydi. (hemoliz, füzyon, resonans) METERYALLER -4 Tüp insan veya at tam kanı -Santrifüj Cihazı -Sakkaroz, Nacl, Fosfat Buffer -Silindir Tüp -Petri Kabı -Cell Culture Hood -İki elektrot -Voltaj Pulser -Osiloskop -Pleksiglastan yapılmış dikdörtgen prizması şeklindeki hücre bölmesi -Işık Mikroskobu -İmmersiyon yağı -Lam, lamel -Hematokrit Cihazı veya mikrohematokrit tüpü -Cell Sytometer -May- Grünwald- Giemsa Boyası METHOD 100 -300 KHZ elektrik alanda tümör büyümesinde önemli derecede yavaşlama, 3 -6 gün içinde tümör hücrelerinde kapsamlı tahribat görülmüştür. İlk etki mitotik döngü üzerinde, ikinci etki ise hücrede ani bir parçalanma şeklindedir. Bu etkiler 3 -6 günde, günde 24 saatte ortaya çıkmaktadır. (1) LITERATÜR İzotonik koşullar altında insan eritrositlerinin birkaç k. V/ cm'lik yüksek voltajlı darbeye maruz bırakılması, kırmızı hücrelerin tamamen hemolize edilmesine yol açar. Burada yapılan deneyler, hemolizin elektrik alanının etkisinden kaynaklandığını göstermektedir. Eğer hücrenin frekansına aynı frekansta bir elektrik üretirsek hücre resonansa girmesinden dolayı parçalanabilir. Bu da hızla bölünen ve adeta ölümsüz olan kanser hücrelerini tahribat etmek için bir yol olabilir. (4) AMAÇ Elektrik alan eritrositlerin hemolizini veya füzyonunu sağlayabilir. Bir sabit DC alanının ve salınım yapan bir alanın bir kombinasyonunun, hücre gözeneklendirme ve hücre füzyonunun etkinliğini arttırması beklenmektedir. Bu çalışma bu fikirlerin deneysel bir testidir. (füzyon, resonans, hemoliz) Sağlıklı, düzenli, gönüllü bağışçı tipi donörlerden alınan ve Anti. HIV, Sifiliz Aglünitasyon, Hbs. Ag, Anti. HCV testleri yapılmış olan tam insan kanı, kan bankasından sağlanacaktır. Bu işlem tam at kanının kullanılması şeklinde de olabilir. Bu düzenekte iki silindirik elektrot arasındaki boşluk 3 cm uzunluğunda olacaktır. Ve bu pleksiglastan yapılmış dikdörtgen prizması şeklindeki hücre bölmesi, klasik cell cultur hood'un içine konulacaktır. Sıcaklık 25 derece olacaktır. Daha sonra oluşturduğumuz hücre kültürü içine steril olarak yerleştirdiğimiz iki alıcı sayesinde kültürün frekansını ölçeceğiz. Belirlediğimiz frekanstaki elektrik alan 12 -24 -48 -72 saat olmak üzere 4 farklı periyotta uygulanacaktır. Hücrelerin yanıt verdiği aralık daha sonra yapılacak sayımlar sonrası belirlenecektir. Hücrelere May. Grünwald- Giemsa yöntemi ile periferik yayma prosedürü uygulanacaktır. Bundan sonra mikroskop aşamasında mikroskop 100'lük büyütmede immersiyon yağı kullanılarak ve mikroskop makrovidası sistematik olarak hareket ettirerek üst sabit tabakanın yakınındaki doubletler araştırılacaktır. Ardından Cell Sitometri ile başlangıçtaki ve sondaki hücre sayıları ölçülecektir. Eritrositler hemoliz yüzdeleri elektrofüzyon özellikleri bakımından karşılaştırılacaktır. REFERANSLAR 1) ED Kirson, Z Gurvich, R Schneiderman, E Dekel (2004) Disruption of cancer cell replication by alternating electric fields - Cancer research, - AACR 2) K Kinosita, TT Tsong (1977) Hemolysis of human erythrocytes by transient electric field- National Academy of Sciences, - National Acad Sciences 3) E Donath, R Arndt (1984) Electric-field-induced fusion of enzyme-treated human red cells: Kinetics of intermembrane protein exchange- Gen. Physiol. Biophys 4)DC Chang (1989) Cell poration and cell fusion using an oscillating electric field - Biophysical journal, 1989 Elsevier GÖRSELLER 1) M Stacey, J Stickley, P Fox, V Statler (2003) Differential effects in cells exposed to ultra-short, high intensity electric fields: cell survival, DNA damage, and cell cycle analysis Genetic Toxicology - Elsevier 2) K Kinosita, TT Tsong (1977) Hemolysis of human erythrocytes by transient electric field- National Academy of Sciences, - National Acad Sciences Makale anahtar kelimelerii: Elektril, Frekans, Hücre, Hemoliz, Füzyon, Resonans, Kanser İletişim adresi: kaderozcan 33@gmail. com
- Slides: 1