Dr Jernimo MartnezGarca Dra Asuncin Soto Dra Ana

Dr. Jerónimo Martínez-García. , Dra. Asunción Soto, Dra. Ana Puertes, Dra. Pilar Sánchez, Dr. Miler Andres Cuellar, Dra. Alicia Cano, Dr. David Collado, Dr. Jose Luis Alonso. HCU Virgen de la Arrixaca. Murcia. Dra. Edith Rodriguez-Braun. H. U. Santa Lucia. Cartagena. Dra. Anabel Alonso. Departamento Genómica. Instituto Murciano de Investigación Biosanitaria (IMIB). DETERMINANTES EN LA EXPRESIÓN GÉNICA DE TP 53 EN PACIENTES CON CARCINOMA SEROSO ALTO GRADO DE OVARIO. Comunicación oral O-22. #SEOM 2018

Introducción y Objetivos INTRODUCCIÓN q Gen supresor TP 53 mutado en 95 -98% de carcinoma de ovario seroso de alto grado (HGSOC). Cole AJ et al. 2016 q Los determinantes de su expresión tisular y plasma no bien conocidos. OBJETIVOS q Analizar tipo mutaciones tp 53 en HGSOC en tejido y sangre periférica. q Relacionar la expresión de mutaciones con la sensibilidad a platino y otras características clínicas. q Valorar la viabilidad de biopsia líquida de tp 53 en HGSOC. #SEOM 2018

Método ORIGEN PACIENTES Estudio regional RENO (estudio prospectivo observacional entre noviembre/2013 y febrero/2017 para estudio de biomarcadores en Ca Ovario Avanzado). (ASCO 2017, #5566) (ESMO 2017, #946 P) SELECCIÓN Pacientes con HGSOC con muestra plasmática de suficiente calidad para estudio de tp 53. MUESTRAS Plasma (EDTA – DNA libre circulante (cf. DNA)) y tejido parafinado. GENÓMICA ü Secuenciación masiva con panel custom Ampliseq para secuenciar TP 53 en DNA libre circulante (cf. DNA). ü Plataforma PGM Ion Torrent. ü Secuencia de referencia GRCh 38 con TMAP 4, incluido en el paquete software Torrent Suite 5. 8. ETICA: El estudio fue aprobado por el comité de ética. #SEOM 2018

Resultados. Características de las pacientes. Platino Sensible Platino Resistente TOTAL Número 16 14 30 Edad Media 56 65 60 Estadio IC-IIC Estadio IIIA-IIIB Estadio IIIC Estadio IV 4 2 9 1 0 1 10 3 4 3 19 4 Cirugía Primaria Cirugía Intervalo No cirugía 5 10 1 2 7 5 7 17 6 Cirugía R 0 R 2 o no cirugía 15 1 6 8 21 9 CA 125 (UI/m. L) 966 1508 1219 HE 4 (pmol/L) 998 1065 1029 cf. DNA (Alu 115) (ng/mc. L) 313 146 235 5/16 (valor 1 -2) 2/14 (valor 7 y 11) 7/30 (23%) CTC (nº/7. 5 ml) #SEOM 2018

Resultados. tp 53 TP 53 Circulante (plasma) Platino Sensible TIPO Missense MUTACION Synonymous Platino Resistente (mutaciones – pacientes) N = 16 27 / 16 Otro tipo Tejido tumoral parafinado T-Student Platino Sensible (mutaciones - pacientes) N = 14 27 / 14 0, 29 9 / 7 5 / 5 0, 11 1 en 1 paciente Platino Resistente (mutaciones – pacientes) N = 16 59 / 16 T-Student (mutaciones - pacientes) N = 14 65 / 14 0, 44 39 / 12 0, 46 6 / 4 MUTACION Pro 72 Arg 15 14 15 13 (nº pacientes) Thr 312 Ser: 13 11 0 0 LOCALIZACION Intron 23 / 16 17 / 13 0, 078 75 / 15 86 / 13 0, 47 DE Exon 4 19 / 15 19 / 14 0, 45 41 / 16 45 / 14 0, 46 MUTACIONES Exon 9 12 / 13 12 / 12 2 / 3 2 / 2 6 / 6 2 / 2 64 / 11 64 / 10 0, 33 37 / 16 33 / 14 0, 40 105 / 16 109 / 14 0, 49 0 0 22 / 15 97% pacientes 20 / 14 100% pacientes 22 / 16 100% pacientes 20 / 14 100% pacientes Otras Mutaciones Total en exon Pac SIN mutación Coincidencia de mutaciones 0, 21 #SEOM 2018 0, 47

Todo bien, pero en Julio/2018… ESTUDIO EN GRUPO CONTROL (plasma) Control Nº Mutaciones en intron Nº mutaciones en exon Mutación Función Coding 1 1 1 Pro 72 Arg Missense c. 215 C>G 2 2 0 3 1 1 Pro 72 Arg Missense c. 215 C>G 4 1 1 Pro 72 Arg Missense c. 215 C>G 5 1 1 Pro 72 Arg Missense c. 215 C>G #SEOM 2018

Nuevos Resultados. Tp 53 TP 53 Circulante (plasma) n=30 Tejido tumoral parafinado. n=30 Datos previos (mutaciones/pacientes) Datos NUEVOS (mutaciones/pacientes) TIPO Missense 56 / 30 28 / 24 135 / 30 107 / 20 MUTACION Synonymous 14 / 12 86 / 26 2 / 2 12 / 8 Otros MUTACION Pro 72 Arg 29 28 (nº pacientes) Thr 312 Ser: 24 24 0 0 LOCALIZACION Intron 45 / 29 182 / 28 DE Exon 4 39 / 29 10 / 10 95 / 30 67 / 26 MUTACIONES Exon 9 25 / 25 5 / 5 8 / 8 133 / 20 72 / 30 43 / 27 233 / 30 205 / 30 0 3 (90% hay mutación) 0 4 (87% hay mutación) 43 / 29 (97% pacientes) 15 / 12 (40% pacientes) Otras Mutaciones Total en exon Pac SIN mutación Coincidencia de mutaciones #SEOM 2018

Conclusiones q El HGSOC se relaciona con la presencia de mutaciones de tp 53 en plasma y tejido. q No hay diferencias de tp 53 entre platino sensible y platino resistente. q Las mutaciones más frecuentes son tipo missense y en exon 4. q Las mutaciones de tp 53 de tejido ovárico se expresan escasamente en sangre periférica. #SEOM 2018