DNAtehnologija Stryer 5 6 poglavje Boyer 13 poglavje
DNA-tehnologija Stryer 5: 6. poglavje Boyer: 13. poglavje Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Razdelitev poglavja • • Osnovna orodja v tehnologiji DNA “Rekombinantna DNA” Gostiteljski organizmi Pridobivanje rekombinantnih proteinov Mutageneza Genetsko spreminjanje evkariontov Nove tehnologije Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Razdelitev poglavja • • Osnovna orodja v tehnologiji DNA “Rekombinantna DNA” Gostiteljski organizmi Pridobivanje rekombinantnih proteinov Mutageneza Genetsko spreminjanje evkariontov Nove tehnologije Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Restrikcijske endonukleaze = restriktaze Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Agarozna gelska elektroforeza Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Prenos Southern in detekcija specifične DNA Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Hybridization of Nucleic Acids DNA 1 DNA 2 RNA Northern hybridization Juang RH (2004) BCbasics Probe Southern hybridization Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Sinteza oligonukleotidov Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Trdni nosilec predstavljajo steklo s kontroliranimi porami (CPG), polistiren ali celulozni filtri. Prvi nukleozid je kovalentno vezan na nosilec. Nukleozid je zaščiten z dimetoksitritilno skupino (DMT). DMT odstranimo s TCA ® prosta 5’-OH skupina za vezavo naslednjega nukleozida. Ta v prisotnosti tetrazola vstopa v reakcijo v obliki fosforamidita in je prav tako na 5’-OH zaščiten z DMT: fosforamidit: Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Določanje nukleotidnega zaporedja DNA Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Verižna reakcija s polimerazo (PCR) Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Razdelitev poglavja • • Osnovna orodja v tehnologiji DNA “Rekombinantna DNA” Gostiteljski organizmi Pridobivanje rekombinantnih proteinov Mutageneza Genetsko spreminjanje evkariontov Nove tehnologije Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Kloniranje genov Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Target Genes Carried by Plasmid Restriction Enzyme DNA Recombination Target Gene Recombination Chromosomal DNA Target Genes Restriction Enzyme Transformation Host Cells Recombinant Plasmid Transformation Juang RH (2004) BCbasics 1 plasmid 1 cell Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Transformiranje bakterijskih celic s kemijsko metodo 60 seconds Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Transformiranje bakterijskih celic z elektroporacijo gojišče LB elektroporator Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Vektorji v tehnologiji rekombinantne DNA • plazmidi • bakteriofagi • fagmidi • kozmidi • bakmidi • umetni kromosomi Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
-galactosidase H 2 N On the plasmid COOH On the chromosome Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
-Complementation -gal MCS -gal Nonfunctional chromosome Nonfunctional E. coli engineered for Blue/White Screening Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
-Complementation -gal MCS Functional chromosome E. coli engineered for Blue/White Screening Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
Marko Dolinar, UL FKKT, 2005
- Slides: 59
