Diagnostic bacteriologique de la TB Antigona Trofor Examen

Diagnostic bacteriologique de la TB Antigona Trofor

Examen de microscopie n On practique un frottis du produit pour identifier les micobacteries acid –alcoolo-resistentes n Le frottis est sterile (anse de bacteriologie), seche a l’air ( a la temperature de la chambre) n Fixation : en flamme 3 fois

Coloration ZIEHL-NEELSEN n n n La coloration speciale pour evidentier les BAAR Substance fluorescente: auramine-rhodamine Coloration avec fuxine en chaleur pour permettre la penetration du colorant a l’interieur des bacteries qui ainsi apparaissent en couleur rouge

Coloration ZIEHL-NEELSEN n n n Decoloraration avec acid –alcool (alcool 70° et acide sulfurique) jusqu’a la disparition macroscopique de la coloration rouge Toutes les structures, en exceptant les micobacteries qui restent rouges, vont se decolorer. Pour le contrast recoloration avec bleu metilen

Examen microscopique n n n En microscope optique a objectiv immersion 100 x Micobacteries sont des batons minces rouges, curbees, +/_granulations, isolees ou gropees en couples/groups, en arrier-plan bleu On compte les BAAR en 100 champs microscopiques Resultats sont exprimes quantitatif en fonction de la densite des bacilles sur la lame La Sensibilite est relativement petite: pour un resultat positive on a besoin du moins de 10000 bacili/ml

Interpretation semicantitative

Culture des micobacteries n n n Methode de referrence pour le diagnostique de la TB Permet l’ identification de la souche de la micobacterie et a tester la sensibilite aux medicaments antituberculeux Produit est decontamine avec solutions antiseptiques homogenisees Ensuite on le centrifuge et on le neutralise avec un acide faible Enfin, on inocule le produit dans le milieu de culture

MILIEU LÖWENSTEIN JENSEN Culture en milieu solide – le standard de reference pour isoler le MT n Le MT va pousser pendant 4 -6 semaines n Culture en milieu liquide avec detection radioactive /fluorescence permet de detecter les MT en 1 -2 semaines n

MILIEU LÖWENSTEIN JENSEN

Culture des micobacteries n n n Les Colonies MT en milieux solides sont rondes, jaune- pale, comme les choux-fleurs, isolees ou confluentes. Identification de l’ espece se fait par des testes de biochimie Les resultats s’expriment semicantitatif en fonction de la densite des colonies.

REFERRENCES n http: //images. google. ro/imgres? imgurl=http: //telmeds. org/AVIM/Abac terio/mycobacterias%2520 y%2520 nocardia/El_medio_de_cultivo_se_l lama_Lowenstein_Jensen. JPG&imgrefurl=http: //telmeds. org/AVIM/A bacterio/mycobacterias%2520 y%2520 nocardia/mycobacterias_nocardi a. htm&h=600&w=900&sz=171&hl=ro&start=15&um=1&tbnid=4 P 7 B w. Iflg. WEkm. M: &tbnh=97&tbnw=146&prev=/images%3 Fq%3 DLowen stein%2 BJENSEN%26 svnum%3 D 10%26 um%3 D 1%26 hl%3 Dro%26 l r%3 Dlang_ro%26 sa%3 DG n Tuberculoza- curs pentru studenti, 2004 - Institutul de Pneumologie “Marius Nasta” Programul National de Control al Tuberculozei n http: //faculty. plattsburgh. edu/jose. deondarza/Bio 406/Handouts/notes_ 09. htm