Determinazione del ferro negli spinaci Scopo dellesperienza e

Determinazione del ferro negli spinaci

Scopo dell’esperienza e principi È noto che gli spinaci sono tra gli alimenti a più elevato contenuto di ferro, la quantità mediamente presente in 100 g di prodotto secco è pari a 30 -40 mg. Il metodo colorimetrico all’o-fenantrolina può essere utilmente impiegato per la determinazione del ferro in tale campione poiché la qualità presente negli spinaci è elevata. Il ferro, portato in soluzione, è ridotto a ione ferroso mediante un trattamento con idrossilammina in ambiente acido. Lo ione ferroso, in presenza di o-fenantrolina (1, 10 fenantrolina C 12 H 18 N 2), forma il complesso [(C 12 H 18 N 2)3 Fe]2+, stabile e colorato di rosso arancio.

Interferenze nel metodo colorimetrico Le interferenze sono dovute a forti ossidanti (che ossidano il Fe 2+ a Fe 3+), ai cianuri, ai nitriti, ai fosfati e ai polifosfati (che complessano il Fe 3+), al cromo, allo zinco, se in concentrazione superiore a due volte quella del ferro, a rame e cobalto, se presenti in misura superiore ai 5 mg/L, al Ni (oltre 2 mg/L) (tutti questi metalli competono con il ferro). Inoltre, bismuto, cadmio, mercurio, molibdati e argento formano precipitati con l’o-fenantrolina. Le interferenze possono essere eliminate mediante ebollizione iniziale in ambiente acido: in tal modo si trasformano i polifosfati in ortofosfati e si rimuovono cianuri e nitriti. La presenza di un eccesso di idrossilammina previene l’azione dei forti ossidanti. La presenza di grosse quantità di ioni metallici, richiede l’aggiunta di un consistente eccesso di o-fenantrolina.

Reattivi utilizzati Soluzione standard di ferro: preparata per pesata di [Fe(NH 4)2(SO 4)2. 6 H 2 O] (PM=392. 14) in modo da ottenere soluzione di 10 mg/L di Fe Soluzione di idrossilammina cloridrato: (NH 2 OH. HCl) al 10% in acqua distillata (15 m. L) Soluzione di o-fenantrolina allo 0. 5% (25 m. L). Sciolta prima con 5 ml di metanolo e poi portata a volume con H 2 O Soluzione tampone: preparata sciogliendo 50 g di. CH 3 COONH 4 in 30 m. L di acqua e aggiungendo 70 m. L di CH 3 COOH glaciale.

Analisi del campione

Attacco del campione Una porzione (5 -6 g) di spinaci “strizzati” in un vetro di orologio, vengono posti in stufa a 180 o. C per circa 1 ora, fino a secchezza. Si pesano esattamente 0. 5 -1 g di spinaci secchi e si pongono in un crogiolo di porcellana. Quindi si calcina in muffola a 500° C per 1 ora. Terminata la calcinazione si lascia raffreddare e quindi si riprende il residuo con HCl conc. scaldando leggermente. Si filtra su carta Watman N. 40 in matraccio da 100 m. L lavando il filtro con acqua distillata e portando a volume.

Metodo colorimetrico

Procedimento Determinazione quantitativa del ferro presente nel campione mediante la costruzione della retta di taratura.

Retta di taratura Si trasferiscono in 4 palloncini tarati da 100 m. L, volumi variabili della soluzione standard di Fe in modo da avere concentrazionidi Fe(II) comprese tra 0. 1 e 4. 5 mg/L. Si aggiunge un po’ d’acqua distillata per lavare le pareti, HCl conc. e idrossilammina. Si attendono 10 minuti affinché quest’ultima possa ridurre l’eventuale Fe 3+ a Fe 2+. Quindi si aggiunge il tampone e l’o-fenantrolina, controllando il p. H, con cartina tornasole, che deve essere compreso tra 3 e 3. 5. Quindi si porta a volume con acqua distillata. Contemporaneamente si allestisce il bianco secondo le stesse modalità, escludendo ovviamente l’aggiunta della soluzione di Fe 2+. Dopo 20 minuti esatti dall’aggiunta dell’o-fenantrolina, si misurato l’assorbanza a l =510 nm, usando il bianco come riferimento.

Analisi del campione Una quantità esatta di soluzione ottenuta dall’attacco del campione si pone in un matraccio da 100 m. L. Si aggiungono i reattivi come per la retta di taratura e si misura l’assorbanza a 510 nm. La procedura viene ripetuta su 3 diverse aliquote di campione per valutare la riproducibilità e la precisione della determinazione.

Elaborazione dei risultati Si costruisce la retta di taratura riportando in grafico l’assorbanza letta a 510 nm vs le concentrazioni di Fe negli standard in mg/L. Attraverso una regressione lineare dei dati si determina l’equazione della retta che meglio interpola i punti ottenuti. Quindi dai valori di assorbanza del campione si ricava, per interpolazione, la quantità di Fe presente nella soluzione d’attacco campione (dalla formula xo=(yo-a)/b dove a e b sono rispettivamente intercetta e pendenza della retta e yo è l’assorbanza del campione). Si effettuano poi i conti necessari per esprimere il risultato in mg/g di Fe nel campione secco.