Determinare il tropismo virale Test TROFILE Monogram Biosciences

Determinare il tropismo virale Test TROFILE™ (Monogram Biosciences)

Trofile. TM: Virus R 5 CD 4 CCR 5 gag pol env Vettore di espressione (luciferasi) gag pol luc Library del vettore di espressione env Infezione CD 4 CXCR 4 Transfezione R 5 X 4 R 5/X 4 (duplice) Aggiunta di inibitori di entrata per confermare il tropismo Whitcomb J, et al. Antimicrob Agents Chemother 2007; 51: 566 -575 2

Risultato del test Trofile. TM che indica un virus R 5 CD 4 CCR 5 Risultato del tropotipo R 5 Infezione CD 4 CXCR 4 D/M X 4 Il virus utilizza i co-recettori CCR 5 per entrare nella cellula CD 4+ R 5 Aggiunta di inibitori di entrata per confermare il tropismo È prevista attività CCR 5 antagonista? SI NO 3

Trofile. TM: virus a tropismo misto CD 4 CCR 5 gag pol env Vettore di espressione (luciferasi) gag pol luc Library del vettore di espressione env Infezione CD 4 CXCR 4 Transfezione R 5 X 4 ( R 5/X 4 (duplice) Aggiunta di inibitori di entrata per confermare il tropismo Whitcomb J, et al. Antimicrob Agents Chemother 2007; 51: 566 -575 4

Risultato del test Trofile. TM che indica un virus a tropismo duplice/misto CD 4 CCR 5 Risultato del tropotipo R 5 Infezione CD 4 CXCR 4 D/M X 4 La popolazione virale doppia/mista può usare i co-recettori CXCR 4 e/o CCR 5 per entrare nella cellula CD 4+. Infettività da X 4 vicina al limite di rilevamento. I risultati del tropismo determinati vicini al limite del rilevamento possono essere variabili su test successivi del campione. D/M Aggiunta di inibitori di entrata per confermare il tropismo Attività dell’antagonista CCR 5 prevista? SI NO 5

Riassunto delle caratteristiche del test Trofile. TM Caratteristiche del test Prestazione Tempo totale richiesto 1 Da 3 a 4 settimane (2 per il test, più circa 1 -2 settimane per il trasporto e i risultati) Sensibilità del test in base alla carica virale* ≥ 1. 000 copie/m. L (95, 4%; n= 104/109)2 Campioni esaminati fino ad oggi Oltre 23. 000 * Proporzione dei campioni con risultati in termini di tropismo al dato livello di HIV-1 RNA; n: campioni positivi (numeratore) e valutati (denominatore). 1. Whitcomb J, et al. Antimicrob Agents Chemother 2007; 51: 566 -575 2. CHMP Assessment Report for Celsentri (International Nonproprietary Name: maraviroc); Procedure No. EMEA/H/C/000811. London, 17 July 2007, Doc. Ref. : EMEA/CHMP/143949/2007 6

Sintesi (1) ● CCR 5 e CXCR 4 sono i principali co-recettori delle chemochine che l’HIV utilizza per entrare nelle cellule CD 4. – Di conseguenza, il tropismo virale viene descritto come R 5, X 4 (per i virus in grado di sfruttare sia uno che l’altro o entrambi i co-recettori) oppure come D/M (duplice/misto). ● I dati recenti che dimostrano l’utilità clinica dei CCR 5 antagonisti, insieme alla disponibilità del test Trofile. TM, che può determinare il tropismo virale (tropotipo) di un paziente con infezione da HIV-1, possono ampliare e incrementare le possibilità del medico di costruire dei regimi antiretrovirali ottimali. 7

Sintesi (2) ● Il test Trofile. TM è facile da somministrare e da interpretare. – Il test ha un tempo di “turn-around” di 2 -3 settimane. – Il referto fornisce al medico una semplice risposta “sì” o “no” circa la probabile efficacia di un CCR 5 antagonista, stimata in base al tropotipo del paziente. ● Nei pazienti già trattati con ARV e infettati solo con ceppi HIV R 5, gli studi clinici hanno dimostrato, con l’aggiunta di un CCR 5 antagonista alla OBT, un miglioramento statisticamente significativo del controllo virale e un aumento della conta delle cellule CD 4 a 24 settimane rispetto a OBT + placebo. – Nei pazienti con HIV D/M, non è attesa una riduzione significativa della carica virale da parte dei CCR 5 antagonisti; tuttavia, in questi pazienti è stato osservato un aumento delle cellule CD 4 -positive dopo 24 settimane. ● L’analisi dei pazienti arruolati negli studi clinici, che sono stati condotti su pazienti già trattati con ARV, ha dimostrato che la 8