Desinfeccin y Esterilizacin Bacteriologa y Micologa Veterinaria M

Desinfección y Esterilización Bacteriología y Micología Veterinaria. M. en C. Gerardo Castillo FMVZ-BUAP Otoño 2012

Definiciones • Bioseguridad: Termino utilizado para referirse a los principios, técnica y practica aplicadas con el fin de evitar la exposición no intencional a patógenos y toxinas, o su liberación accidental.

Definiciones • Antimicrobiano – Agente que mata los microorganismos o suprime su crecimiento y proliferación. • Antiséptico – Sustancia que inhibe el crecimiento y el desarrollo de microorganismos pero no necesariamente los mata. Los antisépticos suelen aplicarse a las superficies corporales.

Definiciones • Biocida – Término general para cualquier agente que mate organismos. • Descontaminación – Cualquier proceso utilizado para eliminar o matar microorganismos. También se utiliza para referirse a la eliminación o neutralización de sustancias químicas peligrosas y materiales radioactivos.

Definiciones • Desinfección – Medio físico o químico de matar microorganismos, pero no necesariamente esporas. • Desinfectante – Sustancia o mezcla de sustancias químicas utilizada para matar microorganismos, pero no necesariamente esporas. Los desinfectantes suelen aplicarse a superficies u objetos inanimados.

Definiciones • Esporicida – Sustancia o mezcla de sustancias químicas utilizadas para matar microorganismos y esporas. • Esterilización – Proceso que mata o elimina todas las clases de microorganismos y esporas.

Definiciones • Germicida químico – Sustancia o mezcla de sustancias químicas utilizada para matar microorganismos. • Microbicida – Sustancia o mezcla de sustancias químicas que mata microorganismos. Este término se utiliza a menudo en lugar de «biocida» , «germicida químico» o «antimicrobiano» .

Limpieza del material del laboratorio • Eliminación de suciedad, materia orgánica y manchas • La suciedad puede interferir con la acción de los descontaminantes • Deben utilizarse materiales que sean químicamente compatibles

Control de microorganismos por medios físicos- Calor Organismo Levaduras Celulas vegetativas 5 min a 50 -60º C Esporas 5 min a 70 -80º C Mohos 30 min a 62º C 30 min a 80º C Bacterias 10 min a 60 -70º C de 2 min a 800 min a 100º C Virus 0. 5 -12 min a 121º C

Esterilización por calor húmedo

Hornos para esterilización por calor seco

Esterilización por calor Pasteurización • 72º C durante 15 segundos Ultra pasteurización • 150º C durante 1 -3 segundos Esterilización por calor seco • 170º C durante 2 -12 horas

Esterilización por filtración • Para reducir la población bacteriana en materiales termosensibles • Filtros de membrana, de acetato de celulosa, de 0. 2 µm • Para productos farmacéuticos, medios de cultivo, antibióticos

Campanas de flujo laminar • Campanas de seguridad biológica • BS 1 y BS 2 • Filtros HEPA (alta eficiencia de retención de partículas de aire) • Partículas mayores de 0. 3 µm

Bacterias Hongos Virus Parasitos Grupo de riesgo 2 B. bronchiseptica, C. botulinum, L. interrogans, M. tuberculosis, S. enterica, Pasteurella sp C. albicans. M. canis, Trichophyton spp, A. fumigatus Phlebovirus, Coronavirus canino, Virus de la hepatitis B, Parvovirus Giardia spp, Leishmania spp Grupo de riesgo 3 B. anthracis, Brucella spp, Rickettsia spp, Y. pestis H. capsulatum Hantavirus, Lentivirus, Rhabdoviridae, genero Lyssavirus Grupo de riesgo 1 Grupo de riesgo 4 Virus de Marbug, Virus Ebola

Esterilización por radiación • Se utiliza la luz UV de 260 nm • Se colocan en las campanas de flujo laminar, previamente a utilizarlas • No atraviesan el cristal, y su eficiencia es afectada por suciedad y agua

1 -20 + + Compuestos fenolicos 10 -50 + + * Hipocloritos 5 -10 + + + Yodoforos 0. 075 -16 + + + Alcohol etílico 700 -850 + + Alcohol isopropilico 700 -850 + Formaldehido 2 -80 Glutaraldehido 20 Compuestos de amonio cuaternario + + + + + + + + * + + + + + + + + Líquidos desecho Descontaminación Cristalería sucia Superficies de trabajo Posibles aplicaciones Toxico Irrita piel Inactivado m. organica Residuos Características principales Corrosivo Endosporas Virus no lipidicos Bacterias vegetativas Microorganismo inactivado Virus lipidicos Dilución empleada (g/litro) +

Características de un agente desinfectante ideal Económico Ecológico De fácil aplicación No toxico ni corrosivo

de acción de un agente desinfectante Concentr ación del agente Tiempo de exposici ón p. H del medio Presenci a de materiale s extraños Temper atura Numero inicial de la població n

Formaldehido • El formaldehído (HCHO) es un gas que mata todos los microorganismos y esporas a temperaturas superiores a los 20°C. • Su acción es relativamente lenta. Se comercializa en forma de polímero sólido (paraformaldehído), o como formol

• Ambas formulaciones se calientan para liberar el gas, que se utiliza en la descontaminación y la desinfección de espacios cerrados como CSB y locales

Glurataldehido • Al igual que el formaldehído, el glutaraldehído (OHC(CH 2)3 CHO) tiene actividad contra formas vegetativas de bacterias, esporas, hongos y virus con y sin envoltura lipídica.

• No es corrosivo y su acción es más rápida que la del formaldehído. No obstante, tarda varias horas en matar las esporas bacterianas. • Son agentes alquilantes que actúan sobre proteínas, lo que provoca modificación irreversible de enzimas e inhibición de la actividad enzimática (Adición nucleofílica de grupos -NH 2 y -SH).

Compuestos fenolicos • Tienen actividad contra las formas vegetativas de las bacterias y contra los virus con envoltura lipídica y, cuando están debidamente formulados, también son activos contra las micobacterias.

• Son desinfectantes que provocan lesiones en la membrana citoplasmática porque desordenan la disposición de las proteínas y fosfolípidos. Esto causa filtración de compuestos celulares, inactivación de enzimas y lisis. Hexaclorofeno

• El triclosán es común en los productos para el lavado de manos. Tiene actividad principalmente contra las formas vegetativas de las bacterias y es inocuo para la piel y las mucosas

Compuestos cuaternarios de amonio • Muchos tipos de compuestos de amonio cuaternario se utilizan como mezclas y a menudo en combinación con otros germicidas, como los alcoholes. • Algunos tipos (por ejemplo, el cloruro de benzalconio) se utilizan como antisépticos.

• Debido a su baja biodegradabilidad, estos compuestos también pueden acumularse en el medio ambiente. • Mecanismo de acción: • Desnaturalización de proteínas, lisis celular, inactivación enzimática

Alcoholes • El etanol (alcohol etílico, C 2 H 5 OH) y el 2 -propanol (alcohol isopropílico, (CH 3)2 CHOH) tienen propiedades desinfectantes similares. • Para conseguir la máxima eficacia deben utilizarse en concentraciones acuosas de aproximadamente un 70% (v/v)

• Lesionan la membrana celular de los microorganismos y desnaturalizan proteínas celulares. Desorganizan la estructura fosfolipídica. • Una de las grandes ventajas de las soluciones acuosas de alcoholes es que no dejan residuo alguno en los objetos tratados

Hipocloritos • El cloro, los hipocloritos y las cloraminas son desinfectantes que actúan sobre proteínas y ácidos nucleicos de los microorganismos. • Oxidan grupos -SH, y atacan grupos aminos, indoles y al hidroxifenol de la tirosina.

• El producto clorado más utilizado en desinfección es el hipoclorito de sodio, que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas, y además es efectivo en un amplio rango de temperaturas.

• Su actividad está influida por la presencia de materia orgánica, pues puede haber en el medio sustancias capaces de reaccionar con los compuestos clorados que disminuyan la concentración efectiva de éstos

Yodoforos • La acción de estos desinfectantes es análoga a la del cloro, aunque pueden ser ligeramente menos susceptibles a la inhibición por la materia orgánica. • El yodo puede manchar los tejidos y las superficies del entorno, y en general no es adecuado como desinfectante. Por otro lado, los yodóforos y las tinturas de yodo son buenos antisépticos.

• La povidona yodada es un agente de lavado quirúrgico fiable e inocuo, y sirve como antiséptico cutáneo preoperatorio.