Dept of Laboratory Medicine Hee Joo Lee Apr

감염병의 검사실진단 Dept. of Laboratory Medicine Hee Joo Lee Apr. 2, 2012

인후 검체 : 운반 지연시 실온 보관 β-hemolytic group A str. (S. pyogenes) : 인후염 Corynebacterium diphtheriae : Albert염색 Neisseria gonorrhoeae : modified Thayer Martin배지 후두개염 원인균 (H. influenzae type b, S. aureus, S. pneumoniae) 농 주사기로 흡인 흡인하지 못하는 경우 : 수송배지 이용 체액 : 오염 되지 않게 생식기 검체 • • 무염색 표본: Trichomonas 임균, Clamydia trachomatis: 핵산증폭교잡법 등

일반 경검 현미경 Phase contrast microscopy Fluorescence microscopy Darkfield microscopy Electron microscopy 염색표본 Gram 염색 항산성염색 형광염색: auramine-rhodamine (mycolic acid와 친화성), Acridine orange, Calcoflour white 면역형광염색: fluorescein isothicyanate (FITC), tetramethyl rhodamine isothianate (TMRI) 단클론성항체 Lactophenol cotton blue

그람양성 구균 Staphylococcus • • 통성 혐기성 그람 양성 구균 Coagulase positive : Staphylococcus aureus v 임상검체에서 분리되는 균의 25%정도 v 피부감염, 중이염, 수술 후 창상 감염, 균혈증, 심내막염, 폐렴, 화농성 관절염, Scalded skin syndrome, toxic shock syndrome, 식중독 90% 이상이 penicillin 내성(β-lactamase 생성) Methicillin resistant S. aureus (mec. A유전자) -PBP 2 a 생성- 세포벽에 β-lactam계 항균제가 결합 하지 못함: 병원에서 분리되는 세균의 70% 정도 Glycopeptide-intermediate 또는 vancomycinintermediate Sta. aureus

• Coagulase negative Staphylococci (CNS) S. epidermidis, S. haemolyticus, S. lugdunensis, S. warneri, S. saprophyticus 피부 상재균의 오염 여부 감별 중요

사슬알균Streptococcus Gram positive cocci 혈청학적: 탄수화물 항원 Lancefield group A, B, C, G 용혈양상: alpha, beta, gamma hemolysis Group A β- hemolytic streptococcus: 사구체 신염 , rheumatic fever Group B β- hemolytic streptococcus: 신생아 패혈증, 수막염 Streptoccocus pneumoniae: 지역사회 폐렴, 수막염, 패혈증

그람음성세균 Gram negative bacilli Enterobacteriaceae 호기성 또는 통성 혐기성 세균 Nitrate를 nitrite 환원 oxidase 음성 gram neg bacilli 대변에서 검출시: Mac. Conkey, SS, XLD, EMB E. coli O 157: Mac. Conkey-sorbitol배지 Extended spectrum beta-lactamase (ESBL) E. coli, K. pneumoniae : 병원감염의 주요 원인균 ESBL생성균 확인 Enterobacter, Citrobacter, Serratia: 3세대 cephalosporin을 계속하여 투여 받은 환자에서 내성으 로 변하는 경향 Salmonella와 Shigella: 1세대와 2세대 cephalosporin, aminoglycoside 항균제에 의하여 치료가 되지 않기 때 문에 감수성으로 보고하지 않는다.

Haemophilus 및 HACEK세균 Haemophilus : 상기도의 정상상재균 H. influenzae b: 수막염, 패혈증, 후두개염 X (Hemin)와 V (nicotineamide adenine dinucleotide, NAD)의 증식촉진인자 필요 (균종 에 따른 차이 있음) HACEK bacteria: 세균성 심내막염 흔히 유발 H. parainfluenzae, Aggregobacter aphrophilus, Aggregobacter actinomycetemcomitans, Cardiobacterium hominis, Eikinella corrodens, Kingella 등이 포함

Gram negative cocci 그람음성 쌍알균 Catalase와 oxidase 양성 Neisseria meningitidis 일반적으로 penicillin에 감수성 Neisseria gonorrhea 검체 채취시 윤활제나 소독제가 섞이지 않게, 솜면봉 채취 시 즉시 접종, endo cervix에서 채취 Penicillin에 내성 70%, beta lactamase에 의함 Spectinomycin에 의한 내성은 드물며ceftriaxone에 의한 내 성은 보고된바 없다.

Clostridium difficile 정상인의 장내 보균율 : 3%, 입원환자의 장내 보균율 : 30% Antibiotic associated diarrhea, pseudomembranous colitis 신선 설사변 10 -20 m. L 우리 나라의 경우 B 독소만 양성인 경우가 많으므로 A & B로 해야 배양 : 선택배지 Cycloserin cefoxitin egg yolk fructose agar (CCFA)

마이코박테리아 Mycobacteria 분류 및 특성 Acid fastness : 염색이 어렵지만 일단 basic fuchsin에 염색이 되면 산-알코 올에 탈색되지 않음 호기성, 비운동성, 항산성 간균 Mycobacteria과-Mycobacterium속 M. tuberculosis complex (MTB complex, M. tuberculosis, M. bovis, M. microti, M. africanum, M. Canetti, M. pinnipedii)나 M. leprae 등 200균종 이 중 40균종 정도가 사 람에 질병을 일으킴 비결핵항산균 (non-tuberculous mycobacteria, NTM)

2. 직접검사 10 -20% KOH : 피부, 조갑, 모발 India ink : 뇌척수액 Calcofluor white : Pneumocystis carinii Fluorescent monoclonal Ab. : 호흡기 검체에서 폐 포자충 검출 Giemsa 및 Wright 염색 3. 조직, 병리학적 검사 Methenamine silver, PAS 4. 혈청학적 검사 면역확산법, 보체고정법, latex 응집법, ELISA Crytococcosis, Aspergillosis, Candidiasis, Sporotrichosis, Blastomycosis, Coccidioidosis, Histoplasmosis

5. 배양검사 1. 배지 Sabouraud dextrose agar (SDA) 비선택배지 : 항균제와 cycloheximide 2. 배양조건 30 o. C에서 최소 4주간 3. 사상형 진균의 동정법 : 균집락과 형태학적 특성 관찰 Lactophenol cotton blue 4. 효모균 진균의 동정법 Germ tube test : C. albicans 상품화된 제품 : API 20 C 등 Corn meal tween 80 agar Nitrate(KNO 3) 동화반응, urease검사, CHROMagar Candida