Critres didentification dun Staphylococcus Bouillon special pour la

Critères d’identification d’un Staphylococcus Bouillon special pour la recherche de la staphylocoagulase Composition Digestion papaïnique de viande de boeuf Hydrolysat de gélatine Citrate trisodique Eau distillée 500 m. L 20 m. L 3 g 480 m. L Source de C et N Source minérale Bouillon CŒUR CERVELLE Composition Infusion de cervelle deveau Infusion de cœur de bœuf Peptone de gélatine Na. Cl Phosphate disodique Glucose Eau distillée 200 g 250 g 10 g 5 g 2, 5 g 2 g qsp 1 L Source de C et N Source minérale Recherche de l’enzyme après 24 heures d’incubation dans ces bouillons à 37°C.

Recheche de la staphylocoagulase 0, 25 m. L de bouillon cœur cervelle : 5 gouttes 0, 25 m. L de plasma oxalaté Bouillon cœur cervelle Tube stérile Incuber à 37°C pendant 30 min à 1 h Plasma oxalaté Incliner délicatement le tube Prise en masse du mélange présence de la Sptaphylocoagulase Le milieu reste liquide absence de la Sptaphylocoagulase

Recherche de la thermonuclease 0, 5 m. L de bouillon cœur cervelle : 10 gouttes Porter au bain-marie à 100°C pendant 15 min Bouillon cœur cervelle Tube stérile 1 goutte de milieu non chauffé 1 goutte de milieu chauffé Puits formé à l’aide d’une pointe de micropipette Incuber 4 heures à 37°C ADN au bleu de touluidine

Lecture Cas n° 1 Mise en évidence des produits d’hydrolyse de l’ADN sur bouillon normal présence d’une activité DNase normale Cas n° 2 Mise en évidence des produits d’hydrolyse de l’ADN après passage à 100°C présence de la thermonucléase Absence de produits d’hydrolyse de l’ADN après passage à 100°C absence de la thermonucléase Mise en évidence des produits d’hydrolyse de l’ADN sur bouillon normal présence d’une activité DNase normale Identification de Staphylococcus aureus entérotoxique Cas n° 3 Si test négatif pour les deux bouillons il ne s’agit pas d’un Staphylococcus aureus Ce n’est pas un Staphylococcus entérotoxique aureus

Pastorex Staph Le réactif Pastorex Staph + contient des particules de latex qui permettent la recherche simultanée sur les Staphylococcus: du facteur d’affinité pour le fibrinogène (RF), désigné sous le nom de coagulase liée, de la protéine A qui possède une affinité pour le fragment Fc des Ig. G des antigènes polysaccharidiques capsulaires des Staphylococcus résistants à la méticiline (antibiotique) Toute agglutination du réactif test en présence d’une souche de Staphylococcus permet d’identifier Staphylococcus aureus. Émulsionner les colonies pendant 10 secondes. Prendre une pipette pour chaque test. Mode opératoire Lame ou plaque d’agglutination 1 goutte de témoin négatif 1 goutte de réactif test Lecture Absence d’agglutination test négatif Présence d’une agglutination en moins de 40 s test positif Identification de Staphylococcus aureus

Schéma explicatif Ac anticapsulaire Protéine A + bille de latex fibrinogène Ig. G S aureus acapsulé Facteur d’affinité pour le fibrinogène Reconnaissance de la protéine A et du facteur d’affinité pour le fibrinogène Agglutination

Ag capsulaire + S aureus capsulé (METI R) Reconnaissance de l’Ag de capsule Agglutination