Construction dune banque gnomique Les BAC ou chromosomes

Construction d’une banque génomique • Les BAC ou chromosomes bactériens artificiels (Bacterial Artificial Chromosomes) sont dérivés du facteur F de conjugaison (voir le chapitre "Régulation de l'expression des gènes"). Ils possèdent donc une origine de réplication et peuvent, naturellement, intégrer des fragments d'ADN bactérien allant jusqu'à 300 kpb. Utilisés comme vecteurs, ils permettent de cloner des fragments de 100 -150 kpb et présentent tous les avantages des vecteurs plasmidiques. • Les YAC ou chromosomes de levure artificiels (Yeast Artificial Chromosomes) sont complètement différents des précédents, car dérivés d'éléments eucaryotiques et seront hébergés et reproduits par des cellules de levure. La construction repose sur des séquences centromériques et télomériques et une origine de réplication de levure. Un site de clonage permet d‘insérer des fragments d'ADN étranger allant jusqu'à 2 Mpb. Ces éléments sont dupliqués et ségrègent à la mitose comme des chromosomes. Ils représentent les seuls vecteurs capables de réaliser des ensembles de clones chevauchants pouvant couvrir l'ensemble d'un génome eucaryote complexe.

Construction d’une banque génomique

Analyse différentielle d’expression Condition contrôle Condition expérimentale