CARACTERIZACIN QUMICA DE LOS EXTRACTOS EN ACETATO DE

CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DE LOS EXTRACTOS EN ACETATO DE ETILO Y METANOL PROVENIENTES DE CUATRO CEPAS DE Trichoderma spp. 1 Reyes ; 2 Manzano ; 2 Choez ; 2 Galarza ; 2 Espinoza Dennys Patricia Iván Luis Fernando 1 Universidad de las Fuerzas Armadas - ESPE, 2 Escuela Superior Politécnica del Litoral (ESPOL) INTRODUCCIÓN RESULTADOS CONCLUSIONES Las cepas de hongos del género Trichoderma son importantes agentes de control biológico aplicados con éxito como bioplaguicidas en todo el mundo, y conocidos productores de metabolitos secundarios con actividad antibiótica (Vinale et al. , 2009). Los resultados del tamizaje químico indicaron la presencia de triterpenos, azúcares reductores y lactonas en todos los extractos de las cuatro cepas de Trichoderma spp. Aminoácidos y saponinas fueron hallados en todos los extractos metanólicos de las cuatro cepas; con la excepción de la cepa C 4 A en donde no se identificó saponinas. Se detectaron alcaloides en los extractos en Et. OAc de C 2 A y C 4 A, en tanto que flavonoides fueron hallados en los dos extractos de las cepas C 2 A y C 3 A, pero no en el extracto metanólico de C 10. Además, se identificaron quinonas en los extractos de C 2 A y C 10 en Et. OAc. Esta investigación contribuyó con el estudio químico de cuatro cepas de Trichoderma spp. aisladas por el Centro de Biotecnología (CIBE), revelando especialmente el gran potencial agrícola y farmacológico de la cepa C 2 A, debido a la presencia principalmente de metabolitos volátiles con varias clases de estructuras como sesquiterpenos, compuestos fenólicos, ácidos grasos, lactonas y quinonas, identificados mediante espectrometría de masas y los índices de retención lineal, y revisados en la literatura con una vasta actividad biológica. El tipo químicamente diverso de metabolitos secundarios producidos por Trichoderma es la fuente de su potencial de control biológico eficiente (Keswani et al. , 2014). Es por esto que, el estudio químico de cuatro cepas de Trichoderma spp. aisladas por el Centro de Biotecnología (CIBE), permitió determinar los metabolitos secundarios, especialmente los compuestos volátiles, producidos por estas cepas, su estructura química y actividad biológica, empleando técnicas analíticas de tamizaje químico, y cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (CG-EM), con la finalidad de develar el potencial biotecnológico de estos organismos pertenecientes a este importante género. MATERIALES Y MÉTODOS Mediante el análisis por CG-EM se identificaron 187 compuestos en el extracto de C 2 A, 125 en el de C 3 A, 151 en el de C 4 A y 114 en el de C 10, todos en Et. OAc; y a través de los IRL, se confirmaron 47 compuestos en C 2 A, 24 en C 3 A, 23 en C 4 A y 19 en C 10. Principalmente se hallaron varios sesquiterpenos, ácidos grasos, ésteres y derivados del benceno, así como algunos alcoholes, compuestos nitrogenados, entre otros. Con relación a los extractos metanólicos, se identificaron al menos 46 compuestos en el extracto de C 2 A, 31 en el de C 3 A, 37 en el de C 4 A y 108 en el de C 10; numerosos picos menores (< 0, 09%) fueron hallados, pero no fueron registrados. A través de los IRL, se confirmaron 11 compuestos en C 2 A, 10 en C 3 A, 10 en C 4 A y 21 en C 10. Dentro de estos extractos se hallaron principalmente carbohidratos, ácidos grasos, ésteres, alcoholes, alcanos y benzaldehídos; entre otros compuestos. * Se utilizaron cuatro cepas del género Trichoderma (C 2 A, C 3 A, C 4 A y C 10), aisladas de cultivos de cacao en la provincia del Guayas e identificadas molecularmente. Al Laboratorio de Fitopatología y al Laboratorio de Bioproductos y Bioprocesos del Centro de Biotecnología (CIBE) por abrirme sus puerta para realizar esta investigación. A la Doctora Patricia Manzano, quien me recibió cálidamente, y especialmente a Iván Choez, quien desde el inicio me asistió con sus conocimientos y su tiempo. 1. Keswani, C. , Mishra, S. , Kumar, B. , Pratap, S. , & Bahadur, H. (2014). Unraveling the efficient applications of secondary metabolites of various Trichoderma spp. Appl Microbiol Biotechnol, 533 -544. 2. Liu, J. , & Liu, G. (2018). Analysis of Secondary Metabolites from Plant Endophytic Fungi. Plant Pathogenic Fungi and Oomycetes. Methods in Molecular Biology, 1848, 25 -38. 3. Miranda, M. , & Cuellar, A. (2000). Manual de prácticas de laboratorio. Cuba: Universidad de la Habana. 4. Vinale, F. , Ghisalberti, E. , Sivasithamparam, K. , Marra, R. , Ritieni, A. , Ferracane, R. , . . . Lorito, M. (2009). Factors affecting the production of Trichoderma harzianum secondary metabolites during the interaction with differentplant pathogens. Letters in Applied Microbiology, 705 -711. El tamizaje químico se efectuó siguiendo el método de Miranda & Cuellar, (2000) con algunas modificaciones. La separación de los metabolitos por CG-EM se realizó con una rampa de temperaturas en el horno: inicial de 70ºC por 2 min, subiendo hasta 300ºC con un gradiente de 5ºC/min, manteniéndose finalmente a 300ºC por 6 min; la temperatura del inyector se programó a 250ºC (splitless) y la del detector a 230ºC. Para el cálculo de los índices de retención lineales (IRL), se inyectó una mezcla estándar de n-alcanos C 7 -C 40. Los compuestos fueron identificados mediante comparación con los espectros de masas de la librería Wiley 9 th con NIST 2011 MS; y mediante los IRL. AGRADECIMIENTOS REFERENCIAS La extracción de metabolitos se realizó en un proceso de extracción continua en fase sólido/líquida, siguiendo el método de Liu & Liu, (2018) con algunas modificaciones. CONTACTO Parte de los principales metabolitos secundarios identificados en la cepa C 2 A que cuentan con actividad biológica importante y que tienen una aplicación potencial en la agricultura y medicina. *Fórmula molecular SESIÓN: Dennys Reyes Araujo Universidad de las Fuerzas Armadas - ESPE Correo electrónico: draraujo 3@gmail. com ORCID: orcid. org/0000 -0002 -1970 -2227 TECNOLOGIAS LIMPIAS Y BIOPRODUCTOS