Biyokimyasal Testler Fermentasyon Testleri Fermentasyon enerji retimi iin
Biyokimyasal Testler Fermentasyon Testleri Fermentasyon enerji üretimi için oksijen molekülüne gerek duyulmayan, susbstrat düzeyinde fosforilasyonun gerçekleştiği biyokimyasal tepkimelerdir. Anaerob, fakültatif anaerob ve mikroaerofil mikroorganizmalar tarafından gerçekleştirilir. Fermentasyon sonunda etanol, laktik asit, bütanol, aseton gibi ürünler oluşur.
Fermentasyon Testleri Clostridium türleri: Bütanol, etanol, aseton Saccharomyces cerevisiae gibi mayalar yada Zymomonas mobilis gibi bakteriler etanol Lactobacillus pentosus gibi bakteriler laktik asit üretebilir.
Fermentasyon Testleri Bu testler kalitatif olarak yapıldığında ortamda genellikle mikroorganizmaların fermente edebilecekleri şekerler ve indikatör maddeler beraber bulunur. Şeker olarak glukoz, laktoz, inülin vb. şekerler kullanılabilir.
Fermentasyon Testleri Fermentasyon sırasında ortamın p. H değeri düşünce, indikatör boyaların rengi değişir. Bu sayede fermentasyonun varlığı anlaşılabilir. İndikatör Asidik ortam Bazik Ortam Bromtimol mavisi sarı Mavi Bromkresol moru Fenol Kırmızısı sarı Mor Kırmızı-Pembe
Fermentasyon Testleri Fermentasyon testleri sırasında ortamda gaz da oluşabilir (CO 2 gibi). Bu gazların varlığı dürham tüpü ile belirlenebilir. Dürham tüpü sıvı besiyerine ters bir şekilde konulduğunda fermentasyon sırasında şayet gaz üretiliyor ise tüpün üst kısmında gözle görülebilinecek şekilde gaz oluşur.
Fermentasyon Testleri 1) Fermentasyon deneyi için glukoz, sükroz, laktoz ve ksiloz içeren dört adet nutrient broth besiyerine fenol kırmızısı konulur. 2) Dürham tüpleri besiyerlerine konulur. 3) Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis bakterilerinin her biri bu besiyerlerine aseptik koşullarda ekilir. 4) Mikroorganizmalar 24 saat 37 ºC’de inkübasyona bırakılır.
Fermentasyon Testleri Aşağıdaki tablo elde edilen sonuçlara göre doldurulur. Deney farklı şekerler için tekrarlanabilir. Glukoz E. coli S. Aureus P. aeruginosa B. subtilis Laktoz Sükroz Ksiloz Gaz Oluşumu
Fermentasyon Testleri Önemli Not: Fermentasyon testlerinde deney periyodik olarak takip edilmeli ve renk değişimi gözlenince deneye son verilmelidir. Eğer deneye devam edilirse besiyerinde bulunan peptonlar mikroorganizmalar tarafından kullanılarak p. H tekrar yükselir p. H yükselmesi sonucu indikatör maddelerin renkleri eski hallerine döner. Bu durumda yalancı negatif sonuç elde edilir.
- Slides: 8