Bacilos Gram Positivos NO Esporuladas EJVICBUSP bevicentusp br

Bacilos Gram Positivos NÃO Esporuladas EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Clostridium Bacillus Corynebacteri um Propionibacte rium

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacilos Gram Positivos Bacillus Características gerais do Gênero: 1. Bacilos, Gram-positivos, facilmente observáveis ao M. O. (grandes) 2. Esporulados 3. Aeróbios ou Facultativos, 4. Crescem com facilidade em meios de cultura comuns, sem a necessidade de adição de fatores de crescimento. 5. Metabolismo – há espécies que são autotróficas (podem utilizar CO 2 como fonte de carbono) 6. Degradam grande variedade de substratos: - derivados de plantas (celulose, amido, pectina, ágar) - derivados de animais (proteínas, hidrocarbonetos, etc) 7. Algumas espécies produzem antibióticos; 8. Ciclo do nitrogênio - algumas espécies fazem: fixação N 2, nitrificação, desnitrificação 9. p. H - algumas espécies são: acidófilas, alcalófilas 10. Temperatura – algumas espécies são termofílicas ou psicrófilas Metabolismo muito Variado

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus Flagellar stains (Leifson's Method) of various species of Bacillus from CDC A maioria das espécies é móvel apresentando flagelo peritríqueo B. subtilis B. polymyxa B. laterosporis B. alveli

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus Coloração de esporos Coloração de WIRTZ ( Coloração com Verde de Malaquita ) : Um esfregaço fixado é corado com: - Solução verde de malaquita e aquecido sobre água fervente por 5 minutos, - lavado com água, - recoberto com o corante de contraste safranina. Os esporos maduros (livres ou dentro das células) retêm a cor verde, e as células vegetativas se coram de vermelho.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Gênero Bacillus Espécies: Há cerca de 50 espécies Espécie mais bem estudada: - B. subtilis Espécies mais patogênicas para o homem: - B. anthracis - B. cereus Espécies empregadas em biotecnologia: - Bacillus thuringiensis (Bt) - Geobacillus stearothermophilus (antigo Bacillus stearothermophilus)

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus subtilis É a espécie mais bem estudada - Transformação genética (1958) – competência natural - Conjugação - Transdução especializada e generalizada - É modelo de estudo dos genes envolvidos na ESPORULAÇÃO

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Gênero Bacillus Espécies: Há cerca de 50 espécies Espécie mais bem estudada: - B. subtilis Espécies mais patogênicas para o homem: - B. anthracis - B. cereus Espécies empregadas em biotecnologia: - Bacillus thuringiensis (Bt) - Geobacillus stearothermophilus (antigo Bacillus stearothermophilus)

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Espécies mais Patogênicas para o homem: - B. cereus - - Intoxicações Carbúnculo ou Antraz alimentares: 1. B. anthracis Após 1 -6 horas: náusea e vômitos sintomas semelhantes a intoxicação por Staphylococcus aureus 2. Após 8 -16 horas: Dores abdominais e diarreia sintomas semelhantes a intoxicação por Clostridium perfringens Bacillus cereus - Descrito por Koch em 1887 - 1880 matou 50% carneiros na Europa - Importância recente: 1) BIOTERRORISMO (EUA) - Contaminação de alimentos: - Japão - EUA (2001) - Europa Bacillus anthracis Placa meio de cultura solido com ágar-sangue

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br B. anthracis Bioterrorismo Em 2001, Esporos de antraz sob a forma de pó foram enviados em cartas pelo correio a várias figuras públicas dos EUA, e estes esporos tinham alta virulência. Estes esporos, supostamente, haviam sido selecionados ou aprimorados geneticamente com finalidade de emprego em bioterrorismo Copia da carta enviada uma autoridade dos EUA contendo esporos de Bacillus anthracis Os esporos de B. anthracis podem ser facilmente obtidos a partir de animais que morreram da doença.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br B. anthracis Ø Bacilo Gram-positivo, formador de esporo, não móvel

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus anthracis Causa a doença Antraz que pode se manifestar: Cutâneo Inalação Gastrointestinal CDC- Centers for Disease Control and Prevention October 31, 2001

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Histórico: Epidemiologia do Antraz no Século 21 st • Agricultores, trabalhadores do campo expostos a animais infectados (casos raros) • Trabalhadores em contato próximo com esporos de B. anthracis ou civis expostos a produtos derivados de animais contaminados (casos raros) • Trabalhadores da Indústria de processamento de lã, cabelos, crinas, ossos, ou outros derivados de produtos animais (atualmente casos raros) • Intencional/bioterrorista: Casos derivados de exposição por inalação e cutânea aos esporos de B. anthracis através do U. S. mail

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Números de casos de antraz nos EUA 2000 w Os casos de doenças são raros e vem diminuindo ao longo dos anos Apenas 18 casos por inalação e demais casos foram cutâneos (menos grave)

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Cutâneo Sintomas: - Começa como uma pápula, progride através de um estágio vesicular para uma úlcera necrótica negra deprimida (escara) - Pode ocorrer edema, vermelhidão e / ou necrose sem ulceração Período de incubação: 1– 12 dias Casos fatais: - Sem tratamento antibiótico - 20% - Com tratamento antibiótico - 1% pápulas

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Cutâneo Úceras necróticas Antebraço lesão com 7 dias vesiculação e ulceração da lesão cutânea inicial macular ou papular de antraz Vesiculação e ulceração da lesão cutânea inicial macular ou papular de antraz. Fonte: Binford CH, Connor DH, eds. Pathology of Tropical and Extraordinary Diseases. Vol 1. Washington, DC: AFIP; 1976: 119. AFIP negative 71 -1290– 2.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz cutâneo progressão Desenvolvimento das Vesículas: Dia 4 Dia 6 Dia 2 Dia 8: Formação de escaras Dia 10

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Cutâneo NEJM 1999; 341: 815– 826

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Cutâneo Curas após tratamento

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Por Inalação § Semelhante a virose (“viral-like” illness), caracterizado por mialgia, fatiga, febre, com ou sem sintomas respiratórios, seguido de hipóxia e dispneia, evidenciado por radiografia § Meningites em 50% dos pacientes § Rinite (raro)

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Por Inalação Alargamento do mediastino e derrame pleural em radiografia de tórax de casos de antraz inalatório. Fonte: Mediastinal widening. JAMA 1999; 281: 1735– 1745

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Antraz: Por Inalação § Extremamente raro nos EUA (menos de 20 cases no ultimo século) § Período de incubação: 1– 7 dias (pode variar até 42 dias) § Casos fatais: § Sem tratamento antibiótico — 97% § Com tratamento antibiótico — 75% te Bio mo s i r o rr UA E s No s ! a cart el p o t fei foi o e de o i v n

Antraz: Gastrointestinal § Dores abdominais, geralmente acompanhada de vômitos com sangue ou diarreia, seguido de sinais de septicemia. § Distúrbios gastrointestinais, ulcerações na orofaringe, adenopatia cervical e Febre § Ocorrem após ingestão de alimentos contaminados não cozidos ou mal cozidos. § Período Incubação: 1– 7 dias § Casos de fatalidade: - 25– 60% quando o tratamento com antibiótico não é iniciado precocemente

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br B. anthracis: Identificação presuntiva Isolados clínicos (sangue, etc. ) Coloração de Gram Coloração de cápsula Cultivo em ágar-sangue Morfologia da Colônia Hemólise Motilidade Coloração de Gram Esporos Verde de Malaquita

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Profilaxia pós-exposição recomendada para prevenir o antraz inalatório Terapia Inicial Duração Adultos Ciprofloxacina Doxiciclina 60 dias Crianças Ciprofloxacina 60 dias Mudar para Amoxicilina se possível

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus Gênero Espécies: Há cerca de 50 espécies Espécie mais bem estudada: - B. subtilis Espécies mais patogênicas para o homem: - B. anthracis - B. cereus Espécies empregadas em biotecnologia: - Bacillus thuringiensis (Bt) - Geobacillus stearothermophilus (antigo Bacillus stearothermophilus)

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus Há muitas espécies de Bacillus que podem são muito benéficas para o homem !

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacillus - Espécies empregadas em biotecnologia Geobacillus stearothermophilus (nome antigo: B. stearothermophilus) - Bacillus thuringiensis (Bt) que contem a “proteína cristal” Larva morta pelo Bt empregada no Empregado como controle biológico do processo de esterilização em autoclaves “Controle Biológico de pragas”

NÃO Esporuladas Bacilos Gram Positivos Clostridium Corynebacteriu m Bacillus Propionibacte rium

Bacilos Gram Positivos Corynebacterium Espécies mais importantes: C. diphtheriae: somente causa doença quando visitada por um bacteriófago C. glutamicum: UTILIZADA para produção industrial de aminoácidos. São agrupadas formando “letras chinesas” como resultado de seu estilo de divisão celular. São AERÓBIAS, NÃO esporuladas.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Corynebacterium diphtheriae Principal fator de virulência: - Toxina diftérica: é uma toxina AB expressa por um bacteriófago Pseudomembrana no final da garganta de uma criança com difteria. A membrana pode crescer e estender-se para baixo sufocando a criança.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Corynebacterium diphtheriae Uma fita de papel de filtro impregnada com antitoxina diftérica Zonas de precipitação antígeno-anticorpo Diagnóstico: O cultivo não é suficiente, emprega-se: - Cultura Teste de imunodifusão de Elek empregado para a detecção da toxina diftérica - ELISA - PCR

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Corynebacterium diphtheriae Profilaxia: - Vacinação com o toxóide (primeiros meses de vida) Vacina tríplice bacteriana (DTP) – obrigatória : - Coqueluche (Bordetella pertussis) - Difteria (Corynebacterium diphtheriae) - Tétano (Clostridium tetani) - Tratamento: - Soro antidiftérico - Antibióticoterapia (Penicilina G)

NÃO Esporuladas Bacilos Gram Positivos Clostridium Corynebacteriu m Bacillus Propionibacte rium

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacilos Gram Positivos Propionibacterium Características: - Pequenos bacilos Gram-positivos, pleomórficos (lembram letras chinesas) - Anaeróbicas, não esporuladas Principais espécies: P. acnes P. granulosum Foram inicialmente descobertas no queijo suíço (Emmental), no qual a produção de CO 2, decorrente das atividades fermentativas, leva a formação dos orifícios característicos, e o ácido propio nico que produzem e pelo menos parcialmente responsável pelo sabor peculiar desse queijo.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br P. acnes P. granulosum Acne Microrganismos que podem estar envolvidos: Propionibacterium acnes (P. acnes) Propionibacterium granulosum Propionibacterium avidum Staphylococcus epidermides Malassezia furfur (Pityrosporum) - fungo

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br P. acnes P. granulosum • Significado Clínico – Fazem parte da microbiota normal da pele - Têm sido implicadas como causa da acne – durante a adolescência P. acnes metaboliza secreção sebácea produzindo ácidos graxos que contribuem para a resposta infamatória na pele. - Fatores de Virulência: - 3 proteases - lipases - interleucinas e - citocinas lipases - fatores quimiotáticos.

EJV-ICB_USP bevicent@usp. br Bacilos Gram Positivos Questões para Estudo: Agora é com vocês! Faça um Quadro Resumo desta Aula contendo: Os nomes dos gêneros de bacilos Gram-positivos, contendo: - Breve descrição de cada um dos gêneros: Morfologia e características gerais (esporulada ou não, aeróbia ou não, etc); - Nomes das principais espécies de cada gênero; - Principais características de virulência de cada espécie ou explicação do porque esta espécie e importante; - Breve descrição das doenças que cada espécie causa. Até mais! bevicent@usp. br á É pra já! T fácil, fácil !!