Aplicacciones tecnolgicas de las Bacterias del cido Lctico

Aplicacciones tecnológicas de las Bacterias del Ácido Láctico

PLANO DA APRESENTAÇÃO ± Bactérias Lácticas Utilização tradicional Novas utilizações das BL L. lactis ± Clonagem e Expressão Sistemas de endereçamento USINA CELULAR

Tecnología del ADN recombinante Microbiologia Bioquímica INTEGRACIÓN Fisiologia Genética

Nuevas utilización de BAL Producción de proteínas heterologas de interes biotecnológico USINA ENZIMAS ANTÍGENOS -Tecnológica - Terapuetica (Probióticos GM) - Veículos vacunales (vacunas orales)

Orden de la membrana Lactococcus lactis Expresión de capa SCapítulo de L. brevi VI Lactococcus lactis: BAL MODELO • Bacteria ampliamente utilizada en la industria alimentaría • De fácil manipulación dentro de las LAB • Sólo la proteína USP 45 es secretada en cantidades suficientes para observarse mediante tinción de Coomassie blue • Información genética disponible

MOTIVOS DE DIRECCIONAMIENTO PROTÉ Sistema NICE de direccionamiento protéico (Le Loir et al. , 2001) Pnis. A nuc p. CYT: Nuc Medio extra-celular Parede celular Membrana Citoplasma Nuc p. SEC: Nuc Pnis. A sp. Usp 45 Medio extra-celular nuc Parede celular Membrana Citoplasma Nuc Medio extra-celular Pnis. A p. ANC: Nuc sp. Usp 45 nuc cwa. M 6 Parede celular Membrana Citoplasma

MOTIVOS DE ENDEREÇAMENTO PROTÉICO sobrenadante Ancla LPXT parede celula membrana CWA SP precursor Proteína secretada Proteína anclada citoplasma

Expresión direccionada Secretada Citoplasmática Anclada

Sistema de expresión NICE

Sistema de expresión XIES Cmr T Nuc Pxyl. T rbsusp 45 spusp 45 Slp Medio extra-celular Pared celular Membrana Citoplasma • Cmr : Resistencia a Cloranfenicol • PXyl T: Promotor de la Xilosa permeasa • rbs usp 45: Sitio de Unión al Ribosoma del gen usp 45 • SP usp 45: Péptido señal de la proteína USP 45

BAL como vehículos vacunales L. Lactis • Se encuentra en números productos lácteos fermentados • Hay una lisis parcial en el intestino • No coloniza el epitelio intestinal • Tiempo de transito es discreto • Efecto se produce en un tiempo limitado

BAL como vehículos vacunales 1. Expresión de antígenos en forma citoplasmática Al ocurrir la lisis parcial en el intestino los antígenos son liberados

BAL como vehículos vacunales 2. Expresión de antígenos en forma secretada Los antígenos interactúan directamente formando parte de la partícula completa o de los fragmentos luego de la lisis parcial

BAL como vehículos vacunales 1. Expresión de antígenos en forma secretada Los antígenos se van liberando para interactuar con el sistema inmune en todo el proceso

BAL como vehículos vacunales Antígeno en forma secretada