Antibiyogram Testleri Broth Mikrodilsyon Yntemi Bu yntem 96

Antibiyogram Testleri Broth Mikrodilüsyon Yöntemi • Bu yöntem 96 kuyucuklu mikroplakalarda gerçekleştirilir ve seri dilüsyona ihtiyaç duyar. • İki kat seri sulandırım sonucunda antibiyotiklerin belirli mikroorganizmalara karşı MİK değerleri belirlenebildiğinden kantitatif sonuç alınabilir. • Disk difüzyon testine göre daha hassas bir test olmasına karşın daha çok iş gücü gerektiren bir yöntemdir.

Antibiyogram Testleri Broth Mikrodilüsyon Yönteminin Uygulanışı • Antibiyotik duyarlılığı incelenecek mikroorganizma için uygun sıvı besiyeri (Mueller Hinton Agar-MHB) hazırlanarak mikroplakalara konulur. • 18 -24 saatlik sıvı mikroorganizma kültürünün bulanıklığı 0, 5 Mc. Farland olacak şekilde ayarlanır. • Çok ya da tek kanallı mikropipetlerle antibiyotik mikroplakalara en yüksek dozdan başlanacak şekilde yerleştirilir. Daha sonra diğer kuyucuklara aynı antibiyotiğin seri sulandırımı yapılır.

Antibiyogram Testleri • Broth Mikrodilüsyon Yönteminin Uygulanışı • Mikroorganizmalar mikropipetler ile kuyucuklara ekilir. • Mikroplakalar 37 ºC’de 18 -24 saat boyunca inkübe edilir. • İnkübasyon sonrasında, mikroplakalardaki gelişim gözle yada mikroplaka okuyucu özelliği olan spektrofotometrede ölçülür. Ölçülen değer CLSI yada EUCAST gibi kurumların bildirmiş olduğu standart değerlere göre karşılaştırılarak mikroorganizmanın o antibiyotiğe karşı duyarlı ya da dirençli olduğu belirlenir.

Antibiyogram Testleri • Broth Mikrodilüsyon Yönteminin Uygulanışı Bu deneyde hiç antibiyotik içermeyen fakat mikroorganizma ve besiyeri içeren kuyucuklar pozitif kontrol olarak kullanılır. Benzer şekilde antibiyotik ve besiyeri içeren fakat mikroorganizma içermeyen kuyucuklar negatif kontrol olarak kullanılır. Pozitif kontrolde üreme olmaması ya da negatif kontrolde üreme olması durumunda deney tekrar edilir.

Antibiyogram Testleri ug/m. L 1 1024 2 512 3 256 4 128 5 64 6 32 7 16 8 8 9 4 10 2 11 1 12 0. 5 A Üreme var B Üreme yok C D E F G H PK PK: Pozitif kontrol NK: Negatif kontrol PK NK NK

Antibiyogram Testleri ug/m. L 1 1024 Üreme yok Üreme var 2 512 3 256 4 128 5 64 6 32 7 16 8 8 9 4 10 2 A PK NK B PK NK C PK NK D PK NK E PK NK F PK NK G PK NK H PK NK PK: Pozitif kontrol NK: Negatif kontrol Yukarıdaki mikrodilüsyon testinin sonuçlarını her bir satır için ayrı MİK değerlerini de belirterek yazınız.

Antibiyogram Testleri NOT: • Sayılanların dışında VITEK gibi otomatize sistemler ya da diğer ticari kitler ile de antibiyogram testleri uygulanabilmektedir. • Bu yöntemler tıp, antibiyotik araştırma ve geliştirmesi gibi alanlarda sıklıkla kullanılmaktadır.