Anorchidie bilatrale et mutations de SF 1 Pascal
Anorchidie bilatérale et mutations de SF 1 Pascal Philibert 1, Lin 2, Delphine Zenaty 3, Sylvie Soskin 4, Félicien Mbou 5 Juliane Léger 3, Françoise Paris 1, 6, John Achermann 2 and Charles Sultan 1, 6 1: Service d'Hormonologie, Hôpital Lapeyronie, CHU Montpellier, France. 2: Institute of Child Health, University College of London, United Kingdom 3: Service d'Endocrinologie Pédiatrique, Hôpital Robert Debré, AP-HP, Paris, France. 4: Service de Pédiatrie I, Unité d'Endocrinologie, Hôpitaux Universitaires de Strasbourg, France. 5: Service de Pédiatrie et Néonatalogie, CHG Lamentin, Martinique, France 6: Unité d'Endocrinologie Pédiatrique, Hôpital Arnaud de Villeneuve, CHU Montpellier, France. Séminaire d'Endocrinologie Pédiatrique – Institut Pasteur – 7 et 8 janvier 2007 PHILIBERT
Anorchidie bilatérale Définition : 1. Absence bilatérale de tissu testiculaire chez un enfant XY, à phénotype masculin (+/- micropénis) 2. Testostérone plasmatique (Base / HCG) AMH FSH 3. Absence de visualisation de tissu testiculaire / Coelio, Chirurgie 1 / 20 000 naissances PHILIBERT
Anorchidie bilatérale Etiologies : 1. Causes mécaniques : Torsions, Occlusions vaculaires, Traumatismes 2. Causes exogènes : perturbateurs endocriniens (? ) 3. Causes génétiques PHILIBERT
Anorchidie bilatérale Facteurs génétiques étudiés : SRY (Lobaccaro et al. 1993) : Pas de mutation LHX 9 (Ottolenghi et al. 2001) : Pas de mutation INSL 3 / LGR 8 (Vinci et al. 2004) : Pas de mutation PHILIBERT
SF 1 dans la formation de la gonade SF 1 : Facteur transcriptionnel Régule des gènes-clef de la différenciation sexuelle: - AMH - Enzymes de la stéroidogenèse - INSL 3 et LGR 8 SF 1 et anorchidie PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 1 -1. Identification de mutation 1 -2. Etude fonctionnelle 1 -3. Trafficking de SF 1 muté 1 -4. Modelisation de la mutation 1 -5. Discussion 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) PHILIBERT
Mutation de SF 1 et Anorchidie V M L 356__ C T G 355__ G T G A 354__ C T G Etude multicentrique Française : L - 24 enfants anorchidies bilatérales - Analyse de SF 1 1 mutation hétérozygote du gene SF 1. A ATG 1 // 2 Stop // 3 // 4 // 5 // Chr 9 q 33 6 // 7 G A B Zinc fingers A Box Hinge region Ligand-Binding Domain 1 461 V 355 M Phosphorylation SUMOylation PHILIBERT
Mutation de SF 1 et Anorchidie SF 1_Human SF 1_Macaque. Rhesus SF 1_Mus SF 1_Rattus SF 1_Canis SF 1_Chicken SF 1_Xenope SF 1_Danio 340 350 360 | | | QAGSLLHSLVLRAQELVLQLLALQLD QAGSLLHSLVLRAQELVLQLHALQLD QAGSILHSLVLRAQELVLHLHSLQVD QAGSTLNNLILRAQELVIFLHSLQVD QAGVTLSGMIQRGQELVQRLQELQLD + Variant non retrouvé sur 60 ADN Contrôles Mutation PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 1 -1. Identification de mutation 1 -2. Etude fonctionnelle 1 -3. Trafficking de SF 1 muté 1 -4. Modelisation de la mutation 1 -5. Discussion 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) PHILIBERT
Mutation de SF 1 et Anorchidie Etude In Vitro * * SF 1 - V 355 M montre une diminution de 20 à 40% de sa capacité de transactivation PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 1 -1. Identification de mutation 1 -2. Etude fonctionnelle 1 -3. Trafficking de SF 1 muté 1 -4. Modelisation de la mutation 1 -5. Discussion 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) PHILIBERT
Mutation de SF 1 et Anorchidie DAPI SF 1 -GFP (-) SF 1 -wt Absence d’anomalie de localisation SF 1 -V 355 M PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 1 -1. Identification de mutation 1 -2. Etude fonctionnelle 1 -3. Trafficking de SF 1 muté 1 -4. Modelisation de la mutation 1 -5. Discussion 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) PHILIBERT
Mutation de SF 1 et Anorchidie Représentation 3 D de la mutation V 355 M La substitution de la Valine 355 par la Methionine montre une gène stérique de ce résidu qui aurait tendance à repousser les deux hélices. Deux conséquences possibles : - Modification du domaine de liaison au ligand - Modification des sites de fixation des cofacteurs transcriptionnels
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 1 -1. Identification de mutation 1 -2. Etude fonctionnelle 1 -3. Trafficking de SF 1 muté 1 -4. Modelisation de la mutation 1 -5. Discussion 1. Présence de la mutation chez le frère jumeau dizygote (Sain) 2. Présence de la mutation chez la mère à l’état hétérozygote Rôle de SF 1 sur la fonction ovarienne? PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin) PHILIBERT
1 -2. Observation spécifique CHU Montpellier Anorchidie bilatérale + micropénis ADN: Substitution G 146 A homozygote : Polymorphisme ou mutation ? A ATG 1 // 2 Stop // 3 // 4 Chr 9 q 33 // 5 // 6 // 7 g c B Zinc fingers A Box Hinge region 1 Ligand-Binding Domain 461 G 146 A Phosphorylation SUMOylation PHILIBERT
1 -2. Observation spécifique CHU Montpellier G 146 A : Mutation ou polymorphisme ? 1. Polymorphisme ? : Rapporté par Wada et al. (2 études différentes) - Cryptorchidie (1 / 2) - Micropénis MAIS : + 60 ADN Contrôle : Négatif 2. Mutation ? : Etude fonctionnelle : 20 % transactivation P 450 scc / Aromatase (Wu. Qiang 2003) Etude fonctionnelle (+ Dr Achermann) : En cours PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) PHILIBERT
1 -3. Observation spécifique CH Lamentin – Dr Mbou Anorchidie bilatérale + micropénis ADN: Mutant G 146 A homozygote Mutation PHILIBERT
Matériels 1. Etude multicentrique : cohorte de 24 anorchidies bilatérales (coordonnée par le Pr Juliane Léger, Hôpital R. Debré) 2. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CHU Montpellier) 3. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + micropénis (CH Lamentin, Dr Mbou) 4. Analyse spécifique : 1 patient anorchidie bilatérale + ambiguité sexuelle (CH Lamentin, Dr Mbou) + Testostérone PHILIBERT
1 -4. Observation spécifique CH Lamentin – Dr Mbou Anorchidie bilatérale + Ambiguité sexuelle sévère - Micropénis - Scrotum bifide -Testo / HCG ADN SF 1: G 146 A Hmz WT 1: IVS 9 + 4 c>t htz (Frasier) Mutation rapportée (Melo et al. JCEM 2002) Ambiguité sexuelle: - Cryptorchidie - Scrotum bifide - Hypospadias Testostérone Normale
Conclusions 1 - Mutation SF 1 : Cause probable d'anorchidie bilatérale 2 - G 146 A : Polymorphisme ? Mutation à pénétrance ou expressivité variable / Background génétique / Environnement Dysgénésie testiculaire Anorchidie bilatérale Détermination / Maintenance SF 1 Ambiguité sexuelle +/- sévère Réversion sexuelle PHILIBERT
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