Abnormal Development of Mouse Embryoid Bodies Lacking p
Abnormal Development of Mouse Embryoid Bodies Lacking p 27 Kip 1 Cell Cycle Regulator Vítězslav Bryja, Lukáš Čajánek, Jiří Pacherník, Anita C. Hall, Viktor Horváth, Petr Dvořák, Aleš Hampla Center for Cell Therapy and Tissue Repair, Charles University, Prague, Czech Republic; b. Department of Molecular Embryology, Institute of Experimental Medicine, Academy of Sciences of the Czech Republic, Prague, Czech Republic; Laboratory of Molecular Embryology, Mendel University Brno, Czech Republic; d. Laboratory of Molecular Neurobiology, Department of Medical Biochemistry and Biophysics, Karolinska Institutet, Stockholm, Sweden; Laboratory of Cytokinetics, Institute of Biophysics, Academy of Sciences of the Czech Republic, Brno, Czech Republic
- Jak ovlivňuje absence p 27 (fenotyp p 27 -/-) diferenciaci ES buněk? - Jaký má absence p 27 vliv na skladbu a activitu cdk komplexů?
Úloha p 27 – rodina p 21, p 27, p 57 - regulátor buněčného cyklu - propojení s regulací diferenciace, ale nejasné - deplece => větší myši, možno revertovat deplecí c. D 1 (samotný c. D 1 -/- => menší myši) => p 27 -/- neplodné samice
Gilbert 1997 / Bílek 2004
Izolace myších ES buněk 6 -8 ddnů IVF Imuno-chirurgie 4 -5 dní 3, 5 dní p. c. ICM TE Vyseknutí a disociace ICM Fibroblastová výživná vrstva „feeder“- tvořená MEF Odstranění PEF Linie ES buněk na feederu MEF Upraveno podle Kroupová 2004 Homogenní populace ES buněk
Rathjen 1998 / Bílek 2004
Immunoprecipitace
Kinase assay
FACS
- Slides: 17