14 TMEGSPEKTROMETRIA 14 1 A tmegspektrometria alapjai 14
- Slides: 43
14. TÖMEGSPEKTROMETRIA 14. 1. A tömegspektrometria alapjai 14. 2. A tömegspektrometria műszerei 14. 3. A tömegspektrometria alakalmazása 1
14. 1. A tömegspektrometria alapjai • Izolált, ionizált részecskék tömeg-töltés arányuk szerinti elválasztása • Angolul: Mass Spectrometry (MS) 2
A tömegspektrométer fő részei: 3
Egyszeres fókuszálású tömegspektrométer 4
Egyszeres fókuszálású készülék: Az anyagot ionizálják, az ionokat először elektromos térben gyorsítják, majd mágneses térben elválasztják. A részecske tömege m, elektromos töltése e. U feszültséggel gyorsítjuk. 5
A kinetikus energia: 6
Homogén mágneses térbe kerül. (A mágneses indukció iránya merőleges a belépő töltés mozgásának irányára) Lorentz erő: e: az ion töltése (az elemi töltés egyszerese, kétszerese, stb. ) v: az ion sebessége B: a mágneses indukció 7
A mozgás irányára merőleges erő körmozgásra készteti az ionokat (centripetális erő). Jobb-kéz szabály: hüvelykujj az áram irányába a többi kinyújtott ujj a mágneses tér irányába. Tenyerünk így az erő irányába mutat. B: merőleges a papír síkjára 8
9
Töltött részecskék szétválása mágneses térben 10
Az ionizáció módszerei a) Elektronütközéses ionizáció (pozitív gyökion) (negatív gyökion) A pozitív gyökionok stabilabbak. A tömegspektrometria csaknem kizárólag pozitív ionok szétválasztásával foglalkozik. 11
Elektronütközéses ionizáció (electron impact, EI) izzószál eminta M+ anód 1. rés: taszító (+) 2. rés: vonzó (-) 3. rés vonzó (-----)
Fragmentáció Az ionok tovább bomlanak párhuzamos és konszekutív reakciókban 13
b) Kémiai ionizáció: nagy feleslegű reagens gáz (CH 4, NH 3, izobután). Elsősorban a reagens gázok ionizálódnak, ezek ütköznek a vizsgálandó molekulákkal. Főleg MH+ ionok keletkeznek. A spektrum egyszerűbb. 14
c) Szekunder ion tömegspektrometria (SIMS, Secondary Ion Mass Spectrometry) Szilárd mintát Ar+ ionokkal vagy O 2+ ionokkal bombáznak. A felületről atomok és ionok lépnek ki. A felület vizsgálatára szolgáló módszer. 15
d) Bombázás gyors atomokkal (FAB, Fast Atomic Bombardment) Nem illékony mintákra alkalmas. A mintát feloldják (pl. glicerinben). Semleges atomokkal (Ar, Xe) bombázzák Biológiai, gyógyszeripari minták vizsgálata 16
The Nobel Prize in Chemistry 2002 "for their development of soft desorption ionisation methods for mass spectrometric analyses of biological macromolecules" John B. Fenn Koichi Tanaka 1917 - 1959 - 17
A repülő elefánt (biológiai makromolekulák ionjai gőzfázisban) 18
ESI = Electrospray Ionisation (Fenn) 3000 V 19
MALDI = matrix-assisted laser desorption-ionisation (Tanaka) mátrix: aromás sav 20
Detektor: elektronsokszorozó Katód az ionok detektálására érzékeny Nincs ablaka (nagy vákuumban van) http: //huygensgcms. gsfc. nasa. gov 21
Felbontás: M a vizsgálat ion móltömege, M az éppen még felbontott két csúcs közötti tömegszámkülönbség Pl. 500 -as felbontás esetén az 1000 -es és az 1002 -es tömegszámú csúcsot külön jelzi, az 1000 -es és az 1001 -es tömegszámú csúcs egybeolvad. 22
14. 2. A tömegspektrometria műszerei Csoportosítás a tömeganalizátor szerint: a) b) c) d) Egyszeres fókuszálású tömegspektrométer Kettős fókuszálású tömegspektrométer Kvadrupol tömegspektrométer Repülési idő tömegspektrométer 23
a) Egyszeres fókuszálású tömegspektrométer 24
Spektrum: mágneses tér változtatásával vagy gyorsító feszültség változtatásával Felbontás: 100 -tól néhány 1000 -ig 25
b) Kettős fókuszálású tömegspektrométer Az ionok elválasztása két lépésben, elektromos térrel és mágneses térrel Felbontás: néhány tíz ezertől 100 ezerig 26
Kettős fókuszálású tömegspektrométer 27
c) Kvadrupol tömegspektrométer Négy elektród (párhuzamos fémrudak) Közöttük halad az ionsugár. Két-két szemben lévő elektród mindig azonos potenciálon van. A potenciálnak váltóáramú és egyenáramú komponense is van. 28
Kvadrupol tömegspektrométer 29 14. 3.
Az elektródok feszültsége az idő függvényében 30 14. 4.
Adott feszültség-amplitúdók esetén egy bizonyos tömegtartományba eső ionok oszcillálnak. Még mielőtt belezuhannának az egyik elektródba, megfordul a polaritás. Így az ionok végigjutnak a rudak közötti üregen és elérik a kilépő rést. Az eltérő m/e-vel rendelkező ionok egyre nagyobb amplitúdóval oszcillálnak, és belezuhannak valamelyik elektródba. 31
Előnyök: gyors (nem a mágneses teret változtatjuk) m/e lineárisan változik a térerősséggel Felbontás: max 3000 32
d) Repülési idő tömegspektrométer (TOF: Time Of Flight) Az iongyorsítóban a különböző tömegű (de azonos töltésű) ionok azonos energiára tesznek szert: A nagyobb tömegűek kisebb sebességűek, a kisebb tömegűek nagyobb sebességűek lesznek. 33
Repülési idő tömegspektrométer Felbontás: néhány száztól néhány százezerig 34
14. 3. A tömegspektrometria alkalmazása a) b) c) d) Analitikai alkalmazás Szerves molekulák szerkezetvizsgálata Polimerek vizsgálata Proteomika: fehérjék vizsgálata 35
a) Analitikai alkalmazás Móltömegek meghatározása Gázkeverékek kvantitatív analízise Nyomelemzés Izotóp-arány mérés Elemanalízis Kromatográfiával kombinált tömegspektrometria (GC-MS, LC-MS) 36
b) Szerves molekulák szerkezetvizsgálata A csúcsok típusai: Molekulacsúcs Fragmens csúcsok M+ A++B Többszörös töltésű csúcsok Metastabil csúcsok (rövid élettartamú ionok) 37
Tiofén 38
n-bután 39
n-bután 1) molekulacsúcs m/e = 58 -nál viszonylag kis intenzitású 2) m/e = 43 -nál van a legvalószínűbb csúcs 58 -43 = 15, tehát egy metil-csoport hasadt le, C 3 H 7+ ionból származik 3) m/e = 59 -nél kis csúcs, 13 C illetve 2 H természetes jelenléte miatt (szatelit csúcs) 4) m/e = 29 C 2 H 5+ de C 4 H 102+ is. 5) m/e = 25, 5 51 -es, 2 -szeres töltésű ion. 40
c) polimerek vizsgálata Polisztirol analízise MALDI-TOF tömegspektrométerrel 20000 -es molekulatömegű polisztirol Mátrix: 2 -nitrofenil-oktiléter U. Bahr, Anal. Chem. 64, 2466 (1992)
d) fehérjék szerkezetvizsgálata 1. lépés: Fehérje bontása enzimmel peptidekre http: //www. moffitt. org/
d) fehérjék szerkezetvizsgálata 2. lépés Fehérje bontásából előállított peptid spektruma (MS/MS)
- Turisztikai termékek csoportosítása
- Táblázatkezelés alapjai
- Könyvelés alapjai
- Párkeltés
- Kraljic mátrix fogalma
- Hosszesztergálás
- Repülés fizikai alapjai
- Co2 hegesztés alapjai
- Krajlic mátrix
- Rendezvény forgatókönyv minta
- Lvai
- Bérszámfejtés alapjai
- Diszjunktív alak
- Kettős könyvelés alapjai
- Esztergálás alapjai
- Gépi nullpont
- Webprogramozás alapjai
- Az immunológia alapjai pdf
- Elektrokardiográfia
- Tömegspektrometria alapjai
- Informatikai biztonság alapjai
- Dresszírozás
- Slidetodoc
- Gyökér irén menedzsment alapjai